饥饿对中华绒螯蟹溞状幼体脂类组成的影响

水产动物，尤其是虾蟹幼体或仔稚鱼，其开食阶段的营养非常关键，如果在其开食阶段不能及时得到合适营养食物而处于饥饿状态，常会导致幼体死亡。因此，研究饥饿对水产动物幼体生长、发育、生化成分及行为等的变化规律，了解其营养状况，对提高幼体成活率和开展天然苗种种质资源保护有十分重要的意义，国内外许多学者在这方面已经做了一些研究工作[1-8]。

中华绒螯蟹俗称河蟹，是我国重要的经济养殖蟹类之一，在我国分布很广，江苏、浙江、上海、山东、辽宁、安徽和福建等省都是中华绒螯蟹的主要产地[9]。随着中华绒螯蟹人工养殖集约化和规模化生产的发展，天然蟹苗供不应求，尤其是长江水系的蟹苗更为紧俏，极大地促进了人工育苗产业的大力发展，但是河蟹人工育苗技术还不太完善，在育苗实践中还有许多问题迫切需要解决。在河蟹育苗过程中，中华绒螯蟹溞状幼体Z1常常由于饵料供应不足而处于饥饿状态，出现很高的死亡率，导致河蟹人工育苗单产极不稳定，不但造成亲蟹大量浪费，而且激化了蟹苗培育和资源保护之间的矛盾。研究在饥饿条件下，中华绒螯蟹溞状幼体Z1脂肪酸组成的变化，从脂类代谢的角度揭示中华绒螯蟹溞状幼体Z1生理状态变化的内在机制，以期为中华绒螯蟹育苗过程中合理投饵、提高幼体成活率和开展中华绒螯蟹天然蟹苗资源保护提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验幼体的准备

从亲蟹池塘中挑选即将孵化的亲蟹放入水簇箱中进行孵化，每个水簇箱放1只亲蟹，共5箱，水体100 L，水温16±1℃，盐度16，pH6.5～7.5，24 h不间断充气。精确预测幼体孵出时间，取刚孵化的幼体进行试验。

1.2 饥饿试验

开始试验前，从每只亲蟹刚孵化出的幼体中随机取30 000只左右，分养在3个玻璃缸中，每缸大约10 000只，水体20 L，试验用水为事先煮沸、冷却的消毒海水，水温16±1℃，盐度16，pH6.5～7.5，24 h不间断充气，试验共分3组，每组5个重复。开始饥饿后，不定期取幼体镜检，观察其肠道和肝胰腺变化，分别在饥饿前、饥饿后9 h(观察肝胰腺脂肪滴明显减少)和24 h(肝胰腺脂肪滴显著减少)分别取幼体作脂类分析。

1.3 总脂提取

将收集幼体用滤纸吸干表面水分，称1 g左右置于35 ml的玻璃比色管中，用20倍体积的氯仿-甲醇液(2∶1)抽提并放入冰箱内保存，24 h后用真空泵于三角漏斗中抽滤，所得滤液移入35 ml比色管中，并加入1/5体积的蒸馏水，混合均匀，静置分层；分层后，弃去上层，将留有下层的比色管用真空泵抽干，然后用1 ml的氯仿-甲醇液(1∶1)溶解，4℃冰箱中保存于1.5 ml离心管中，以备气相色谱分析用[10]。

1.4 脂肪酸分析

[3] 聂文强,李 婧,吉 红,等.匙吻鲟稚鱼摄食节律与饥饿对其体脂肪酸组成的影响[J].水产科学,2017,36(1):36-41.

3.离子交换法。用无机或有机物组成一混合凝胶，形成交换剂核，四周包围两层不同电荷的双电层，水通过后可发生离子交换。阳离子交换剂：含H+、Na+固体与Ca2+、Mg2+交换；阴离子交换剂：含碱性基因，能与水中阴离子交换。经过离子交换后，硬水得到软化。

2) 根据所提出的循环迭代算法及通过三维扫描仪对复杂腔体表面进行反求建模实验研究，获得与零件表面相一致的三维实体模型，其效率大大高于三坐标测量仪，并可以对原产品的破损处进行修复、提取需加工的三维曲面模型。

1.4.2 气相色谱参数设置

近年来，随着国内钾肥产业不断扩大，产量快速增加，提高国产钾肥市场份额、保障我国钾肥自给、提升中国在国际钾肥市场中的地位和进口谈判中的主动权，成为世界钾肥价格洼地。国产钾肥的发展，极大地减少了我国钾肥的对外依存度，为保障我国粮食安全做出了突出的贡献。

[1] 王晓龙,温海深,张美昭,等.花鲈初孵仔鱼饥饿不可逆点的确定及摄食节律研究[J].中国海洋大学学报(自然科学版),2017,47(5):57-64.

所有脂肪酸标准样品均购自Sigma公司，用正己烷配制成一定浓度，在同样的参数条件下，分别在一定的洗脱时间形成峰，并借此作为脂肪酸的定性依据。脂肪酸的定量采用面积归一法。

1.4.3 脂肪酸标准试剂曲线的制作

1.5 数据处理与统计分析

脂含量%

采用ANOVA进行单因子方差分析，并用Duncan’s法进行多重比较。

2 结果

2.1 饥饿对中华绒螯蟹溞状幼体脂含量的影响

由表1可以看出，刚孵化的幼体随着饥饿时间的延长，其脂含量逐渐减少。饥饿前幼体脂含量为8.77%，而饥饿24 h后幼体脂含量为3.23%，比饥饿前下降了5.54个百分点，差异极显著，与饥饿9 h的6%相比，下降了2.77个百分点，但差异不显著。

 

表1 饥饿状态下中华绒螯蟹溞状幼体脂含量的变化(n=5)

  

饥饿时间开始饥饿饥饿后9h饥饿后24hX±sd8.77±2.60a6.00±2.06ab3.23±1.92b

注：同行肩注小写字母不同表示二者差异显著。

2.2 饥饿对中华绒螯蟹溞状幼体脂肪酸组成的影响

饥饿不同时间对中华绒螯蟹溞状幼体脂肪酸组成的影响如表2所示。刚孵化出来的幼体其脂肪酸组成中主要有C14∶0、C15∶0、C15∶1、C16∶0、C16∶1、C17∶1、C17∶0、C18∶3n-3、C18∶2n-6、C18∶1n-9、C18∶1n-7、C18∶0、C20∶5n-3、C20∶4n-6、C22∶6n-3、C22∶5n-3。

随着饥饿时间的延长，饱和脂肪酸中C14∶0、C15∶0、C16∶0(C17∶0和C18∶0除外)的含量都有不同程度的下降，∑SFA却相对稍微上升，但差异不显著；单不饱和脂肪酸中C15∶1、C16∶1含量均有所较少，虽然C18∶1n-7含量有所上升，但C18∶1n-9含量的下降幅度更大，总体看来，C18∶1(C18∶1n-7+C18∶1n-9)含量还是表现出下降趋势，∑MUFA更是从41.64%下降到37.47%；高不饱和脂肪酸含量却随着饥饿时间的延长而升高，其相对含量由32.25%上升到34.66%，上升了2.41个百分点。

 

表2 饥饿条件下中华绒螯蟹溞状幼体脂肪酸组成的变化(n=5)

  

脂肪酸开始饥饿饥饿后9h饥饿后24hC14∶00.79±0.070.76±0.120.74±0.17C15∶10.14±0.090.13±0.100.13±0.10C15∶00.46±0070.44±0.080.44±0.10C16∶16.24±1.875.90±1.975.54±2.22C16∶015.93±0.4115.88±0.6615.89±0.35C17∶10.60±0.200.60±0.250.61±0.24C17∶00.66±0.100.70±0.100.75±0.14C18∶3n-30.36±0.240.39±0.080.38±0.23C18∶2n-62.49±2.523.70±2.553.57±2.47C18∶1n-928.30±4.8426.00±4.6524.46±5.30C18∶1n-76.36±1.106.47±1.056.73±0.59C18∶05.62±0.845.85±1.016.33±1.34C20∶5n-316.53±3.4017.26±3.6818.33±4.45C20∶4n-64.44±0.314.57±0.554.66±0.58C22∶6n-310.74±1.5310.79±1.4710.98±1.57C22∶5n-30.55±0.430.65±0.430.68±0.24∑SFA23.46±0.9523.68±0.9424.12±0.91∑MUFA41.64±5.8639.10±5.9437.47±7.46∑HUFA32.25±4.6633.27±5.5134.66±6.14∑n-328.17±4.4829.09±5.0530.38±5.92∑n-66.93±2.528.27±2.488.23±2.50∑n-3/∑n-64.073.523.69

3 讨论

3.1 中华绒螯蟹溞状幼体饥饿状态下能量代谢的物质基础

关于早期饥饿对十足目类动物幼体生化组成成分的影响国内外已有报道[11-13]，但关于饥饿对中华绒螯蟹溞状幼体生化组成成分的影响未见报道。本试验结果表明，在幼体孵化后的24 h，中华绒螯蟹溞幼体的脂类含量显著下降。这些脂类的下降主要来源于幼体肝胰腺的脂类，因为幼体脂类大部分存储在肝胰腺，胚胎的其他组织脂类含量非常少[14]，而且从形态观察也能明显看出在饥饿24 h后肝胰腺脂肪滴明显降低，所以肝胰腺脂类是幼体饥饿情况下中华绒螯蟹溞主要的能源物质。这和前人的研究结果一致[13，15-17]。

肝胰腺是甲壳动物重要的脂类存储器官，肝胰腺存储足够的脂类是幼体顺利蜕皮的前提。成永旭等[17]研究发现中华绒螯蟹幼体Z1的PNR为109 h。持续饥饿时机体动用脂类必将降低肝胰腺脂类存储，导致幼体营养状况恶化，抗病力下降，幼体蜕皮推迟，发育期延长，成活率降低，而且对后期幼体的摄食、生长和发育都有很大的影响，如果饥饿时间超过其不可逆点PNR，将可能对幼体肝胰腺的线粒体及脂类贮存系统造成不可逆损伤，从而使幼体丧失代谢和储藏脂类的能力[18]，使幼体丧失摄食能力，即使能存活一段时间，但最终会因得不到食物缺少营养而死亡。可见，脂类储存对中华绒螯蟹溞状幼体的生长发育非常重要。所以，要提高幼体开食阶段的成活率，一方面要注意亲体培育过程中脂类的营养需求，使卵在发育过程中有充分的脂类储存，在胚胎发育以后，幼体孵出时，仍有较高含量的脂类储存，提高抗饥饿能力，同时在育苗过程中，要注意根据孵化时间合理安排饵料，及时投喂高脂饵料以满足幼体的营养需求，增加幼体体内的脂类储存，以提高幼体成活率。

Corvis ST与SS-1000 OCT测量CCT的值分别为（553±28）μm和（540±28）μm，Corvis ST测得的CCT值比SS-1000 OCT大13 μm，差异有统计学意义（t=-6.037，P＜0.001）。Bland-Altman分析显示，Corvis ST与SS-1000 OCT测量的95%LoA为-15.2～41.6 μm，2种仪器具有良好的一致性。见图2。

3.2 饥饿对中华绒螯蟹溞状幼体脂肪酸组成的影响

刚孵化的中华绒螯蟹溞状幼体Z1在饥饿状态下，C14∶0、C15∶0、C15∶1、C16∶1、C16∶0、C18∶1n-9含量的比例均下降，说明这些脂肪酸主要作为能量来源被代谢消耗，而高度不饱和脂肪酸C20∶5n-3、C20∶4n-6、C22∶6n-3、C22∶5n-3略有上升，这种情况可能是因为在幼体正常发育过程中，短链脂肪酸机体优先作为能量物质被消耗，而长链脂肪酸常被选择性用来构建组织[19]，这种脂肪酸的变化反映了脂肪酸代谢的趋势。按照这种趋势，高不饱和脂肪酸的上升应该比较明显，但是本试验幼体在饥饿状态下，由于饥饿的胁迫，机体必须首先满足能量代谢的需要，即动用体内大部分长链脂肪酸来分解供能，所以其相对含量虽然上升，但不显著。

[参考文献]

所用气相色谱仪为Agilent 6890系列气相色谱系统，毛细管柱为30.0 m×0.25 μm(温度上限为325℃)的HP-55%Phenyl methyl siloxane，型号为Agilent19091J-413；进样器温度为300℃；检测器温度为300℃；起始温度为60℃，保留2 min，然后以20℃/min的速度升至150℃，再以4℃/min的速度升至280℃，共计39 min。H2流速为40 ml/min，空气流速为400 ml/min，补偿气体N2流速为35 ml/min，分流比为1∶20；压力为60 kPa。

[2] 范 帆,尹 飞,彭士明,等.饥饿胁迫对曼氏无针乌贼幼体的影响[J].生态学杂志,2011,30(10):2 262-2 268.

针对这种情况，中共中央于1986年9月第十二届六中全会作出《关于社会主义精神文明建设指导方针的决议》，系统地阐明了社会主义精神文明建设的基本理论和方针政策，初步涉及到党在社会主义初级阶段的思想文化建设。此后，经过20年的探索与实践，2006年10月中共中央在十六届六中全会上提出“建设社会主义核心价值体系”科学命题。在此基础上，2011年10月中共中央又在十七届六中全会上作出了《关于深化文化体制改革，推动社会主义文化大发展大繁荣若干重大问题的决定》。

1.4.1 脂肪酸甲酯化

将1.5 ml离心管中保存的脂类真空干燥，加入1 ml KOH-甲醇溶液(1∶1)和1 ml苯-石油醚(1∶1)溶液处理15 min，然后加蒸馏水定容至8 ml，混匀，静置分层，约20 min。取上层于1.5 ml离心管中，准备气相色谱分析。

[4] 孟庆武,张秀梅,张沛东,等.饥饿对凡纳滨对虾仔虾摄食行为和消化酶活力的影响[J].海洋水产研究,2006,27(5):44-50.

(2)严密监测生命体征：治疗量的吗啡对呼吸有抑制作用，使呼吸频率减慢，潮气量降低，部分患者可出现胸壁肌肉的僵硬而表现为胸闷、憋气。同时还应注意麻醉镇痛药可抑制交感神经兴奋引起的去甲肾上腺素的释放，使机体痛阈提高，同时可使脉搏减慢，血压降低。因此在镇痛期间护士应监测血压、脉搏、呼吸，以便及时正确了解病情发展[9]。

[5] 李少菁,曾朝曙.饥饿对锯缘青蟹(scylls serrata)幼体存活与发育的影响[J].厦门大学学报(自然科学版),2001,40(3):782-788.

[9] 周 鑫.中华绒螯蟹人繁技术的新进展及存在问题[J].科学养鱼,1999(5):7-8.

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混合高斯模型在对前景进行检测前,通常需要训练背景,即使用GMM训练每帧图像中的背景。根据提取出的背景对前景进行检测和匹配,根据匹配与否得出是背景还是前景。得到前景图像并对图像以目标为中心划定区域[6],这个区域就是接下来HOG进行特征提取的区域。所得GMM原图及其对应前景图像如图1所示。

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湖北省各个地区的自然地理条件并不相同，每个地区发展农业循环经济的方式应该根据各自的地理位置、经济情况、以及自身独特的发展优势来进行。结合前面分析得出的相关结论，提出以下发展湖北省农业循环经济的建议：

[17] 成永旭,吴旭干,许德田等.用摄食监测法对中华绒螯蟹溞状幼体PNR研究[J].华东师范大学学报(自然科学版),2000(12):28-31.

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综上所述，中国基层社区一度面临着社区治理主体的空洞化和社区治理客体的空洞化，缺少整体利益代言人的基层社区和缺乏公民能力的个体无法通过理性协商的方式主动解决集体行动和公共利益的难题[10]。理论和实践上照搬西方治理模式无法解决传统官僚制下的等级机构向治理时代的网络结构的转变。党群治理模式较好的回应了社会治理各多元主体在全民共建共享的治理格局中所处的地位和发挥的作用，在社区信息化建设中，社区作为运作平台，以项目运作为工作核心流程连接社区治理的各主体，借助现代化信息手段使社区回归共同体本质。

2016年10月18日，江西日报社推出江西融媒体“中央厨房”智慧云平台——赣鄱云，这是江西报刊媒体首个融媒体云平台。随后，江西日报社又推出了“江西头条”移动云平台。