透明托盘法使用生物活性玻璃对牙髓腔渗透性的影响

牙齿漂白治疗与瓷贴面或全瓷冠相比，对牙釉质损伤小，操作简便，因此更被变色牙患者所接受[1-2]。目前常见的漂白剂多为过氧化物凝胶或溶液，过氧化氢(H2O2)和过氧化脲为常用的过氧化物成分，一般诊室漂白所用的过氧化氢浓度较高(35%或40%)，家庭漂白剂多为低浓度的过氧化物，如10%过氧化脲。漂白剂中含有或可分解生成过氧化氢，过氧化氢通过渗透作用渗入牙釉质进入牙本质，在牙釉质和牙本质中自由扩散，进而分解释放出新生态氧和超氧化物自由基是漂白牙齿的主要物质之一，可直接在牙体表面或内部反应，导致有机物多聚体双链氧化解离，氧化着色成分，产生美白疗效。但由于过氧化物的低分子量和具有使蛋白质变性的能力，其自身也能够通过牙釉质和牙本质进入髓腔，因此有大量文献报道漂白术中或术后大部分的患者会出现牙齿敏感或疼痛[3]。

生物活性玻璃(bioactive glasses，BGs)在体液环境下，会释放钙、磷离子，形成羟基碳酸盐磷灰石[4]，堵塞牙本质小管，减少牙本质敏感。本研究在漂白前将透明托盘和生物活性玻璃脱敏剂结合使用，预处理即将漂白的牙面，利用透明托盘与牙齿良好的贴合性以及对生物活性玻璃脱敏剂的承托性，使生物活性玻璃在牙表面形成再矿化物，修复釉质表面微孔隙和微裂纹，更好地阻止过氧化物由微裂纹渗入牙髓组织。本研究通过测定过氧化氢渗透进牙髓腔的量来探讨生物活性玻璃脱敏剂是否可以用于降低过氧化氢对牙髓组织产生的有害影响，及透明托盘的配合使用是否会对过氧化氢的髓腔渗入量产生影响。

1 材料和方法

1.1 实验材料和仪器

生物活性玻璃膏体(奥敏清TM北京大清生物技术有限公司，批号2011062302)；人工唾液，依ISO/TR 10993-9:1994标准配方配制。30%过氧化氢溶液(南京化学试剂公司，批号20160811)，光固化间隙树脂(Ultradent公司，美国)，流动树脂(3M公司，美国)，乙酸盐缓冲液(Sigma 公司，美国)；无色结晶紫(Sigma 公司，美国)；辣根过氧化物酶(Sigma公司，美国)；Erkoform-3型压膜机(Erkodent公司，德国)；紫外可见分光光度计UV-2600(SHIMADZU公司，日本)。

经过实地走访调查，在观测井外围1 km范围内虽有民用水抽水情况，但现场测量水位埋深位于22～26 m，高于兰考豫11井观测水位15 m左右，可见浅层地下水的开采不是本次异常出现的根本原因。

1.2 实验方法

1.2.1 试样分组 选择2107年3月期间在南京医科大学附属口腔医院口腔颌面外科18～40岁患者因正畸需要拔除的第一前磨牙48颗，无龋坏、无裂纹、无修复体，分6组，每组8颗牙。A组表面无处理+去离子水组，B组表面无处理+30%过氧化氢组，C组表面脱敏剂涂抹法处理+30%过氧化氢组，D组表面脱敏剂透明托盘处理+30%过氧化氢组，E组表面脱敏剂涂抹法处理+去离子水组，F组表面脱敏剂透明托盘处理+去离子水组。所有离体牙去除牙周膜，超声充分去除残留牙结石等钙化物，去离子水中超声荡洗30 s，在颊面距离釉牙骨质界1mm处选取固定大小空白区域作为涂布漂白剂和脱敏剂区域。

取一定量过氧化氢溶液，加入100 μL结晶紫溶液，50 μL辣根过氧化氢酶溶液，乙酸缓冲液定容到10 mL，振荡30 s，可见光596 nm测定吸光度，以浓度和吸光度做线性回归，绘制过氧化氢浓度和吸光度的标准曲线。过氧化氢标准曲线如图1所示。

1.2.2 过氧化氢标准溶液的配制和吸光度的测定 配制0.5 g/L的结晶紫溶液和1.0 g/L的辣根过氧化氢酶溶液。再分别配制浓度为0.05 mg/L，0.10 mg/L，0.25 mg/L，0.50 mg/L，1.0 mg/L，2.5 mg/L，5.0 mg/L的过氧化氢溶液。

在技校语文教学中，教师也要清醒地看到，技校学生的文化知识基础薄弱且普遍具有“厌学”情绪。因此在课堂教学中。教师应该充分尊重学生的意愿、个性、兴趣和爱好，鼓励学生积极思考，对所学知识进行分析、比较、概括。如:在讲授《哦，香雪》《项链》等课文时，可以让学生联系今天改革开放和市场经济的新形势，思考应该怎样提高自己的综合素质，从容应对各种机遇与挑战。在讲到第五单元的《爱情诗二首》《情人节的玫瑰绽开在教室里》时，让学生了解真正的爱情是什么，从而树立正确的爱情观等等。

  

图1 过氧化氢浓度和吸光度标准曲线Fig.1 H2O2 concentration standard curve vs absorbance

1.2.4 试样处理 A、B两组颊侧预留区域不做脱敏处理，C、E组颊侧在预留区域用生物活性玻璃脱敏剂涂抹2次每次2 min，间隔12 h，涂抹完后用去离子水冲洗15 s，期间浸没于人工唾液，共24 h，去离子水冲洗颊面15 s，D、F组使用透明托盘+生物活性玻璃脱敏剂处理，将样本在人工唾液中浸泡1 h后去离子水流水冲洗掉表面脱敏剂，浸没于人工唾液共24 h。

牙釉质是牙体最致密的部分，但仍有研究表明过氧化氢和过氧化脲可以渗透进牙釉质和牙本质。前期临床研究显示，大约66%的漂白治疗的病人经历过牙齿敏感或牙龈刺激[5]。相关实验室研究也证实过氧化氢漂白剂渗透进髓腔会导致牙髓出现微弱、短暂的炎症反应，甚至一些不可逆的牙髓变化[6]。过氧化氢或过氧化脲渗入髓腔内的速度与过氧化物的浓度、过氧化物与牙体接触的时间、牙体上是否有充填物、微裂纹或釉质表面空隙等因素密切相关[7-8]。

  

图2 压膜机制作透明托盘Fig.2 The making procedure of transparent tray

1.2.3 透明托盘的制备 在D、F组2组试样颊侧空白区域，用光固化间隙树脂制作1.5 mm厚间隙树脂层，光固化后，将2组样本包埋在藻酸盐印模材料中，用Erkoform-3型压模机使用1.0 mm厚软质膜片在175 ℃下对其压膜成型，制作出匹配的透明压膜托盘，而后去除试样颊侧的间隙树脂层(图2)。

对使用了过氧化氢漂白的B、C、D 3组髓腔内的过氧化氢的含量进行单因素方差分析，其髓腔内的过氧化氢含量有差异，差异有统计学意义。B组>C组>D组(F=459.748，P<0.05)。

  

图3 预留出间隙树脂空间的透明托盘Fig.3 Transparent tray with reserved space for resin

  

图4 截根后涂布指甲油的试样Fig.4 Specimen coated with nail polish afterthe cutting of tooth root

  

图5 牙冠倒置于不同溶液中Fig.5 Dental crown reversely placed in different solutions

各组浸泡30 min后，分别将髓腔内的乙酸盐缓冲液移至玻璃管中，并用100 μL的去离子水冲洗髓腔2次，冲洗液加入同一玻璃试管中，加入0.5 g/L的结晶紫100 μL和1 g/L的辣根过氧化物酶50 μL，用去离子水滴定至5 mL，置于振荡器上振荡30 s，而后测定其596 nm波长处的吸光度，通过标准曲线计算过氧化氢的浓度(mg/L)，换算出其总量(μg)。

1.3 统计学分析

生物活性玻璃(BGs)，是一种以钙钠磷硅酸为活性成分的矿物质，具有良好的生物相容性和生物安全性，接触唾液后，钙磷离子释放，在牙本质表面形成碳酸羟基磷灰石层[16-17]，有效封堵牙本质，降低牙齿的渗透性，是治疗牙本质敏感的一种极具前景的新型生物活性材料。本研究尝试在牙齿漂白前将纳米级生物活性玻璃脱敏剂用于牙齿表面预处理，通过测定过氧化氢渗透进牙髓腔的总量来探讨生物活性玻璃脱敏剂是否可以用于降低过氧化氢的髓腔渗入量，从而减少过氧化氢对牙髓组织的刺激。

2 结 果

各组所测髓腔内渗入的过氧化氢含量如表1所示，其中未浸泡过氧化氢溶液的A、E、F 3组离体牙髓腔中未检测出过氧化氢。

4.利用电极带，可精确控制热输入量：三板连接（两张厚板、一张薄板）对于传统的点焊来说是个老大难问题。焊点在厚板范围内形成，不足以抓住薄板。而DeltaSpot的电极带通过其额外的热输入有针对性地控制焊点的深度。因此，薄板范围中的低热量能够通过电极带利用高电阻来弥补。焊点以这种方式充分深入薄板。同时焊点形状更加对称，在薄板范围内的焊缝体积更大。

处理完成后，所有样本在距釉牙骨质界3 mm处截除牙根，用快球钻扩大进入髓室内的通路，刮匙去尽牙髓组织，去离子水冲洗、干燥。在颊面距釉牙骨质界1 mm处选取固定大小空白区域，牙面其他部分涂双层指甲油，牙冠倒置，用结扎丝和流动树脂在离体牙的舌侧分别将试样固定。待髓室干燥后加入25 μL 2 mol/L乙酸盐缓冲液，37 ℃下将A、E、F组牙冠倒置浸泡于去离子水中30 min，B、C、D组牙冠倒置浸泡于30%过氧化氢溶液中30 min(图3～5)。

 

表1 各组所测髓腔内渗入的过氧化氢含量Tab.1 The content of H2O2 penetration into pulp cavityof each group

  

分组表面处理30%H2O2漂白剂H2O2含量/μgA—-0．0B—+21．149±0．489CBGs涂抹法+9．813±0．426DBGs托盘法+4．065±0．268EBGs涂抹法-0．0FBGs托盘法-0．0

3 讨 论

方志敏战斗的岁月正是中国革命斗争环境最恶劣、形势最艰险的年代。在一切艰难险阻面前，方志敏始终保持着不怕困难、艰苦奋斗的大无畏英雄气概。在各种利益诱惑面前，方志敏始终保持着一个共产党人的操守。真正做到了一身正气、两袖清风、甘守清贫。

因此使用脱敏剂来降低牙齿漂白引起的敏感是一个有效的选择[9-11]。硝酸钾、氟化钠作为脱敏剂常用于牙齿漂白术前或术后，也有商品将其添加在漂白剂中，研究发现其在降低牙齿敏感的同时并未影响漂白疗效[12]。但硝酸钾作为一种化学药物脱敏剂，主要是通过降低牙髓神经的反应性达到脱敏目的[13-14]，未能减少过氧化物渗透进髓腔所造成的牙髓损伤。而氟化钠作为一种传统的脱敏剂，其作用原理是形成氟化钙晶体，修复釉质表面的微裂纹，降低漂白引起的敏感，但这种晶体小并且附着力差，刷牙时较易脱落[15]。

根据标准曲线换算各组渗入进髓腔内的过氧化氢含量(μg)，用SPASS 17.0统计软件处理，单因素方差分析各组髓腔内过氧化氢含量，P<0.05有统计学差异。

零件总的加工误差Σ△为各项误差之和，因此工件加工精度的条件是Σ△≤Δk 即工件的总加工公差δk。为保证夹具寿命能在设定范围内，为防止因磨损过大而过早报废，需留出一定的精度储备量Jc。因此将上式改写为：具中加工时，Σ△=δK-δ△≥0，当Jc≥0时，夹具能满足工件的加工各项要求。

目前临床上多采用局部涂抹法使用脱敏剂，此方法由于受到局部涂擦时间、部位以及脱敏剂黏着性等多种因素的影响，其脱敏疗效有所局限。透明压膜托盘常用作正畸治疗中的保持器[18]，目前尚未有将透明托盘用于生物活性玻璃脱敏剂治疗漂白性敏感的相关报道，本实验试将个性化定制的透明托盘作为脱敏剂的载体，将生物活性玻璃脱敏剂放入透明托盘内预留的储存空间中，戴入需要漂白的牙列区域时可直接密合在所需漂白牙齿的颊面上，减缓生物活性玻璃被唾液稀释的速度，延长生物活性玻璃脱敏剂的局部作用时间，使用方法简便易行、可靠有效，同时也有利于医生的监管。另外本实验所选用的过氧化物酶+无色结晶紫定量测定过氧化氢含量的方法为现有的最灵敏的检测过氧化氢方法。本方法中选用辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)作为发生在含有结晶紫的乙酸盐缓冲液中的氧化反应的催化剂。HRP酶催化的最适合pH在5左右。因此本实验中乙酸盐缓冲液选用pH为4.5的乙酸-乙酸钠缓冲液，充分保证了HRP的活性。髓腔内的过氧化氢在无色结晶紫的存在下被辣根过氧化物酶催化分解产生水和有色物质，以反应发生的色变程度来检测髓腔内过氧化氢的含量。故本实验通过测定过氧化氢渗透进经过或未经生物活性玻璃处理的离体牙牙髓腔内的量来探讨生物活性玻璃脱敏剂是否可以用来减少过氧化氢对牙髓组织的刺激反应以及透明压膜托盘的使用是否会对过氧化氢渗入量有所影响。

本实验结果显示未浸泡30%过氧化氢溶液的离体牙髓腔中未检测出过氧化氢：A组表面无处理+去离子水组、E组表面生物活性玻璃脱敏剂涂抹法处理+去离子水组、F组表面脱敏剂透明托盘处理+去离子水组髓腔内过氧化氢的含量为0；而未经生物活性玻璃脱敏的离体牙，过氧化氢溶液可以渗入其髓腔，且浓度最高，即B组表面无处理+30%过氧化氢组测得过氧化氢含量为21.149 μg±0.489 μg。这与国外学者对完整牙的过氧化氢髓腔渗入的研究所测得值相近[19]，说明漂白剂在使用过程中会有部分过氧化氢通过牙釉质和牙本质渗透进髓腔内。用涂抹法预先使用生物活性玻璃脱敏剂的C组离体牙在30%过氧化氢溶液中浸泡30 min后测得髓腔内过氧化氢的含量有所下降，所测过氧化氢含量为9.813 μg±0.426 μg。而使用透明托盘作为载体预先使用生物活性玻璃进行牙面预处理的D组，在30%过氧化氢溶液中浸泡30 min后，测得髓腔内过氧化氢含量最低，为4.065 μg±0.268 μg。之前有研究[14,20-21]在漂白前预先使用氟化物对牙面预处理来预防漂白过程中出现的牙齿敏感，氟化物是通过在牙面形成氟化钙晶体从而减少牙本质小管的半径，阻断管内液体流动，来减少牙齿的敏感，同时氟化钙晶体在釉质表面形成还可以增加釉质的抗力，来抵御釉质在漂白过程中出现的脱矿现象。而之前有多项研究已经证实，生物活性玻璃脱敏剂与氟化物脱敏剂相比，生物活性玻璃所形成的再矿化物更多、更致密[4,22]，脱敏效果也更佳。

本实验所用的纳米级生物活性玻璃与人工唾液接触后形成纳米级的碳酸羟基磷灰石再矿化物与牙本质小管连接紧密，有效阻断小管液流动，从而降低牙齿敏感，同时还可以促进牙体硬组织表面的再矿化，有效修复釉质表面微裂纹及微空隙，减少了过氧化氢通过牙釉质和牙本质渗入进髓腔的量，从而减少过氧化氢对牙髓的刺激。因此透明托盘作为载体结合生物活性玻璃对漂白牙进行预处理，进一步减少过氧化氢的髓腔渗透，可加强生物活性玻璃的脱敏疗效。

因此，在语文阅读教学活动中，教师要有意识地安排学生进行阅读，多给学生想象的空间，要从多角度启发学生进行阅读等都是很有必要的。

4 结 论

生物活性玻璃脱敏剂可用于减少漂白剂的髓腔渗透，透明压膜托盘的配合使用能进一步减少过氧化氢的髓腔渗入量，从而一定程度上减少其对牙髓的不良刺激，但生物活性玻璃脱敏剂及透明托盘对于减少漂白性敏感的临床疗效还需进一步临床试验进行验证。

[参 考 文 献]

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