芍药苷对深Ⅱ度烫伤诱导的肝损伤小鼠肝组织Bax、Caspase-3表达的影响

芍药苷(paeoniflorin，PF)是从中草药芍药中提取的化合物，在药物化学分类中属于单萜类糖苷化合物[1]。近些年来，大量基础研究提示芍药苷具有一定的药理作用[2]。烫伤是日常生活和战时常见且复杂的外伤疾病，烫伤可导致休克、组织器官缺血缺氧，进一步损伤肝肾肺等实体器官[3]。近几年，中药成分用于烫伤所致脏器损伤是研究热点之一[4]。作者通过研究芍药苷对深Ⅱ度烫伤诱导的肝损伤小鼠肝组织谷丙转氨酶(alanine transaminase，ALT)、谷草转氨酶(glutamic-oxalacetic transaminase，AST)水平和Bax、Caspase-3表达，为烫伤所诱发的肝损伤防治提供依据，现报道如下。

1　材料与方法

1.1　实验用品与试剂　组织蜡块切片机(德国Leica公司)，芍药苷(西安昊轩生物科技有限责任公司)，ALT与AST试剂盒(艾美捷科技有限公司)，兔源单抗Bax、Caspase-3(美国CST公司生产)，ABC免疫组化试剂盒(天津麦兰波公司)，DAB组化显色试剂套装(天津麦兰波公司)。

1.2　实验动物　雄BABc小鼠30只，体质量25～30 g，由军事医学科学院实验动物中心提供，在SPF级条件下饲养。

1.3　动物建模与用药　30只BABc小鼠随机分为3组，每组10只，分别为对照组、模型组、芍药苷组。对模型组、芍药苷组小鼠进行Ⅱ度烫伤处理：实验前使用100 g·L-1硫化钠背部去毛，采用水合氯醛(400 mg·kg-1)麻醉小鼠，采用90 ℃热水烫伤小鼠皮肤，造成占15%体表总面积的深Ⅱ度创面[5]。芍药苷组则在建模前按60 mg·kg-1芍药苷进行灌胃1次。

1.4　样品采集与处理　烫伤后12 h处死小鼠，并取血与肝组织，检测ALT与AST 水平变化情况。肝脏固定于4%中性甲醛溶液中，按病理科实验程序制作组织石蜡切片，然后进行HE染色与免疫组化标记Bax、Caspase-3表达与定位。

大学生体质弱势群体公共体育教育“理论+实践”融合育人模式适用于所有类型的体质弱势大学生，不仅要对其进行体育理论教育，还要加以康复性运动技能教育。该模式的要义在于“融合育人，文化育人，实践育人”，要求创编与选用应用型体育保健类教材，开发康复性体育运动技能等。“理论+实践”融合育人模式强调不仅要向学生教授以保健性、康复性、养生性运动技能为主的体育保健课程内容，还要从体育文化理论的视角入手，向体质弱势学生传授体育保健理论知识，从而提升学生对自我价值的认知，建立体育参与自信心，进而全面发掘体质弱势大学生体育学习的主观能动性，持续强化学生体育习得的主观体验感、幸福感与获得感。

1.5　统计学方法　使用SPSS 22.0统计软件进行分析，计量资料结果以±s)表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK法，以P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1　小鼠ALT与AST 水平变化　与对照组比较，烫伤处理后的小鼠血清 ALT与AST 水平显著上升，两组间差异有统计学意义(P<0.05)；而芍药苷组经芍药苷提前预处理后，小鼠血清ALT与AST水平与模型组比较，差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组比较，芍药苷组小鼠血清 ALT与AST 水平差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

 

表1　芍药苷对损伤小鼠ALT与AST的影响(n=10)　U/L

  

组　别指　标ALTAST对照组102．22±33．14①143．56±42．71①模型组362．32±56．54466．98±66．43芍药苷组183．25±43．77①277．39±52．66①

注：①与模型相比较：P<0.05。

肉鸡生长过程中常见的病害都是通过病毒、细菌、真菌等病原体进行繁殖和传播，这些病原体大多喜欢温度和湿度较高的环境，若养殖场中保持高温、高湿度、通风不畅，病原体会大量滋生，对肉鸡进行传播，导致肉鸡患病；且肉鸡养殖场内的肉鸡数量多以万计数，每天排泄出的粪便重量上吨，若不能及时清理和消毒，粪便中存在的病菌也容易在温湿度适宜的环境中大面积繁殖，对周围肉鸡进行传染，或污染饲料，导致肉鸡患病。

2.3　肝损伤小鼠Bax、Caspase-3表达　对3组小鼠肝组织进行免疫组化染色，光镜下可见肝脏细胞胞浆内出现棕黄色颗粒，此着色间接体现为Bax、Caspase-3表达阳性。Bax与Caspase-3蛋白在对照组小鼠肝组织中呈低表达，而烫伤处理后的小鼠肝组织Bax、Caspase-3表达增高；芍药苷预处理的小鼠肝组织Bax、Caspase-3表达均有不同程度减少，结果提示芍药苷可抑制深Ⅱ度烫伤诱导的肝损伤小鼠肝组织Bax、Caspase-3表达，见图2。

  

图1　小鼠肝组织病理变化(HE，×400)

  

图2　小鼠肝组织Bax、Caspase-3 表达(免疫组化染色,×400)

3　讨论

[4]　夏建国,项尽一,王晖,等.异丙酚对严重烫伤兔的肝保护效应[J].中华麻醉学杂志,2015,35(7):834-836.

机体内外各种因素上调Bax表达，均能促进机体内细胞凋亡或细胞坏死[12]。Caspase-3作为蛋白水解酶类，可涉及细胞信号传导及细胞死亡的执行[13]，当机体遭到复杂因素刺激时，Caspase-3则转为活性片段Cleave Caspase-3，激活凋亡的级联反应[14]，诱导细胞凋亡或死亡[15]。免疫组化结果表明，对照组小鼠肝组织Bax、Caspase-3低表达，模型组小鼠肝组织Bax、Caspase-3阳性表达明显增多，而芍药苷组小鼠肝组织Bax、Caspase-3表达程度均有不同程度降低。经芍药苷干预的小鼠血清 ALT与AST含量明显减少，小鼠肝脏组织病理学结果得到明显改善，肝小叶结构较完整，提示芍药苷可有效减轻深Ⅱ度烫伤诱导的肝损伤，其机制可能与降低Bax、Caspase-3表达以抑制肝细胞凋亡有关。

垦区应坚持黑土地可持续发展利用的理念，充分发挥垦区环境优良、作业规范、管理严格的优势，积极推广有机肥施用、绿色植保防控、合理轮作倒茬、秸秆还田等技术，大力发展以“公司+基地+农户”为代表的有机农业发展模式，加快全国绿色食品标准化原料生产基地建设，推动水稻、玉米有机食品认证步伐，提升农产品质量安全。

[10]张昆,夏建国,项尽一,等.异丙酚对兔严重烫伤并发肺损伤的保护作用[J].中华实验外科杂志,2015,32(12):3211.

李老黑干杯后，胳膊伸直，酒杯倒转，杯口斜对着我，让我验杯。李老黑不愧是久经考验的酒场老手，杯中居然滴酒未剩。李老黑的酒杯像探照灯一样在我头顶晃了晃，我知道他这样做不单是让我验杯，更多是包含了催促的意思。

通过对智能工程建设过程中各阶段的了解，发现智能工程建造中存在着各种影响因素。因此，为确保政府大楼智能工程项目可以按时保质完成，需要在智能工程建设施工中进行方案设计，做好工程进度控制。

[7]　宋学敏,王焱林,李建国,等.电针足三里对严重烫伤致大鼠急性肺损伤的影响[J].中华麻醉学杂志,2010,30(4):469-472.

随着改革开放的深入，企业在市场中的竞争日趋激烈，而员工的素质对于提升企业在市场中的竞争力有着重要的影响，员工素质主要有思想素质、政治素质、身体素质、技术能力素质等，而在众多的素质中，思想政治素质是核心和灵魂，只有保证员工有着先进的思想政治素质才能够推动员工不断提升自我，为企业的发展做出贡献。

[3]　王彦博,姚咏明,王强,等.血必净注射液对烫伤大鼠高迁移率族蛋白B1表达和急性肝损伤的影响[J].中华烧伤杂志,2009,25(3):171-175.

严重烫伤后各器官会发生不同程度的缺血缺氧损伤[6]，若不及时治疗 ，会产生大量氧自由基、炎性介质等有害物质[7-8]，损害各器官功能[9-10]。ALT与AST 主要存在于肝细胞中，当肝细胞受损时血中含量增加；深度烫伤可引起肝细胞损伤，且ALT与AST释放入血增加[11]。结果显示，烫伤后的小鼠血清 ALT与AST 水平显著上升，而芍药苷组经芍药苷提前预处理后，小鼠血清ALT与AST水平与模型组比较显著减少；与对照组比较，芍药苷组小鼠血清 ALT与AST 水平差异无统计学意义。与对照组相比，烫伤处理后小鼠肝脏组织出现细胞变性与坏死，坏死诱发炎性细胞浸润，损伤程度明显，较严重区域可见肝小叶结构遭受破坏；而芍药苷预处理后小鼠肝脏组织损伤改变减轻，肝小叶结构较完整。实验结果表明，芍药苷可有效减轻深Ⅱ度烫伤诱导的肝损伤。

[5]　王忠堂,姚咏明,盛志勇,等.休克期切痂对烫伤大鼠肝HMGB1表达及肝功能的影响[J].中华急诊医学杂志,2004,13(12):823-825.

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2.2　小鼠肝组织病理变化　在HE染色中，与对照组相比，烫伤处理后小鼠肝脏组织出现细胞水肿，部分区域可见坏死，且坏死诱发炎性细胞浸润，损伤程度明显，较严重区域可见肝小叶结构遭受破坏。而芍药苷预处理后小鼠肝脏组病理学改变明显减轻，肝小叶结构较完整，见图1。

[8]　邵庆波,章雄,陈雪莲,等.冬眠合剂对严重烫伤大鼠早期肺组织的保护作用[J].上海交通大学学报(医学版),2010,30(11):1338-1342.

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参考文献：

矿区及周边主要出露三叠纪火山岩，侏罗系及白垩系、古近系。下侏罗统漾江组(J1y)主要为灰紫色中细粒岩屑砂岩、粉砂质泥岩碎屑岩和橄榄玄武岩、安山玄武岩等火山岩；中侏罗统花开左组(J2h)主要为为紫红色泥质粉砂岩夹暗紫红色岩屑石英砂岩。上侏罗统坝注路组(J3b)为紫红色泥岩、粉砂质泥岩夹紫红色细砂岩。

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牵引采煤机是煤矿资源开发利用中最重要的机电设备，是有机械、电气、液压等为一体的大型的复杂机电系统。在牵引采煤机中引入电牵引技术，不仅显著提高了采煤机的工作动力，提升了采煤机的稳定性能，还有效减少了采煤机发生故障的频率。与传统的液压牵引技术相比，电牵引技术提高了采煤机的工作性能和安全性能，增强了采煤机的控制性能，实现了自动化控制的目的。