酶联免疫法与胶体金法检测HIV抗体的效果观察

随着人们物质生活水平的不断提高，社会环境以及人文环境的不断发展、不断变化，带动了社会意识形态的变化和各种精神文化的不断丰富和完善，并呈现多元化发展趋势，同时吸毒、同性性行为等也有所增加，加上人口的流动性也在逐渐增加，使得艾滋病患者以及HIV感染者的人数也随之逐渐上升，因其所导致的死亡人数也在不断上升[1]。艾滋病是由于HIV病毒感染，所引起的世界范围内较为严重的一种全身性传染病，主要的传播途径包括血液传播、性传播以及母婴垂直传播[2]。临床上HIV相关症状包括发热、淋巴结肿大、咳嗽等，而HIV感染者在无症状期，一般无临床表现[3]，无症状期患者在接受临床治疗时，极容易误诊或漏诊，不仅会导致患者的治疗时间出现延误，且极可能导致患者因治疗方法的错误出现病情加重的严重后果，这对艾滋病患者及HIV感染者的治疗是一个较大的威胁，因此，临床上对于如何准确的对艾滋病患者及HIV感染者进行诊断以及检测进行了深入的研究与实验。临床上发现，对患者进行HIV抗体检测，对于更好地对患者进行诊断、治疗以及预防均有着极大的促进以及指导作用，可以更好为临床上的诊断工作提供参考依据，目前临床上较为常用的HIV抗体检测方法主要是酶联免疫法与胶体金法[4]。正是基于这种情况，本文主要对酶联免疫法与胶体金法检测HIV抗体的效果进行对比观察分析，为HIV抗体在临床上的检验工作提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2016年7月1日-2017年11月30日期间在我院接受治疗的患者的1,752份血清标本作为本研究的对象，标本选择患者的年龄在18岁-65岁，体质量39.50 kg-80.50 kg，平均体质量58.20 kg。且所有标本试验均取得受试患者同意，属于自愿参与研究试验。

1.2 实验方法

1.2.1 检测试剂 酶联免疫法，所使用的试剂为人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（北京万泰生物药业产）。胶体金法，所使用的试剂为人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒（英科新创，厦门产）。

由于2#转化器内部温度达600多摄氏度，加之转化一层压力在转化所有床层中是最高的，经过长时间运行，造成金属材质疲劳，强度下降，转化器不锈钢底板产生高温蠕变并呈锅底形状，导致内外部T型梁断裂、支柱歪倒、触媒格栅断裂。存在触媒层垮塌的风险，严重影响系统的安全运行。设计转化器承受压力明显未达到设计值，存在缺陷。

1.2.5 检测方法 使用不含抗凝剂的红色帽普通真空采血管，对受试患者进行样本采集，采集前要求患者空腹12 h，均采用坐位抽取静脉血约5 mL，室温下自然放置1 h-2 h，待血液凝固、血块收缩后再用3,000 r/min离心15 min，吸出血清，置于备用容器中，血清待检[8]。以两种试剂及检验仪器的操作说明为基础，按照实验室操作规程，分别对患者的血清样本进行检测。酶联免疫法先将试剂在室温平衡30 min后加样，经过温育、洗板、加酶、显色等步骤，加终止液后10 min内酶标仪检测结果。胶体金法用移液器取待检血清滴加到试剂加样处，20 min观察并记录结果。

制动液、齿轮油勿用机油替代：制动液是机车液力制动系统传递压力的介质，主要成份为蓖麻油和醇类，其溶解性好且不易沉淀、无腐蚀，与橡胶体接触时，橡胶体的膨胀率小。而机油则不具有这些优良特性，若用机油代替，则易产生沉淀，并使制动系统橡胶件产生膨胀，容易造成制动失灵。机油与齿轮油相比，粘度低，抗压抗磨性和耐负荷能力也较弱。若用机油代替齿轮油，则传动齿轮不易挂带油膜、润滑效果变差，会造成传动齿轮早期磨损，从而导致各部件性能的有效发挥，其危害程度无法估量。

1.2.3 检测原理 酶联免疫法，采用双抗原夹心法酶联免疫吸附试验原理，在微孔条上预包被高纯度重组HIV抗原，配以酶标记抗原及显色剂等试剂，检测血清中的HIV抗体[5]。胶体金法，采用胶体金免疫技术和层析原理，定性检测血清样本中的HIV抗体，阳性样本中的HIV抗体与胶体金标记抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组HIV抗原结合形成“胶体金标记抗原-HIV抗体-重组HIV抗原”夹心物而凝聚显色，游离的胶体金标记抗原则在对照线处与鼠抗HIV单克隆抗体结合而富集显色，阴性标本则仅在对照线处显色[6]。

即便马克思的意思确实是实践是检验认识是否具有真理性的方法或途径，这方法或途径还是处在拟接受检验的真理之外，它自身并不构成认识的真理性，真理和实践是两种不同的东西。在检验方法论者看来，命题p是否真理，只能通过实践X的途径来检验，但X本身绝不是构成p之真理性的因素。然而真理概念构成论者要断言的却是：实践活动是真理概念的构成因素，即命题p是真理，实践X却是构成真理p的内在因素。

1.2.2 检测仪器设备 酶联免疫法以及胶体金法所使用的仪器包括：MR-96A酶标仪（深圳迈瑞产）、MW-12A洗板机（深圳迈瑞产）、HH.W2.Cu600型电热恒温水温箱（上海医疗器械六厂产）、HR40-IIA2生物安全柜（青岛海尔产）、Thermo单道移液器10 μL-100 μL（上海热电产）、BY-400C型医用离心机（北京白洋医疗器械产）。

1.2.4 检测条件 实验室温度18oC-25oC，相对湿度30%-60%[7]。

1.3 观察指标 对两种检测方法的结果进行对比研究。结果判定标准：（1）酶联免疫法的判定标准：对样本进行检测后，样本的A值超过临界值（CUTOFF），则说明检测结果为HIV抗体阳性（有反应），反之则说明检测结果为HIV抗体阴性（无反应）。（2）胶体金法的判定标准：对样本进行检测后，试条检测线和对照线位置各出现一条紫红色的条带，则说明检测结果为HIV抗体阳性（有反应），只在对照线位置出现一条紫红色条带则说明检测结果为HIV抗体阴性（无反应）。

④过渡区。该区位于垫层下游，水平宽度5 m，采用C1砂砾料场全料，要求设计相对紧密度大于或等于0.85。

酶联免疫法的检测阳性率与胶体金法相比无明显差异（P＞0.05）。详细数据见表1。

2 结果

1.4 数据处理 本研究数据均采用SPSS 19.0软件进行统计学处理，计数资料采用率（%）表示，组间比较采用χ2检验；计量资料采用均数±标准差（Mean±SD）表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

 

表1 两种检测方法结果情况调查表［n（%）］

  

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3 讨论

随着社会环境的不断发展和变化，我国艾滋病患者及HIV感染者的人数也逐渐上升，因艾滋病所导致的死亡人数也在不断上升。截至2017年12月31日，全国报告现存活HIV感染者/艾滋病人758,610例，报告死亡239,289例。存活HIV感染者437,377例，艾滋病人321,233例。全年新发现HIV感染者/艾滋病人134,512例，既往HIV感染者全年转化为艾滋病人18,231例。全年报告死亡30,718例中，全年死亡26,787例，既往死亡3,931例。全年新发现的HIV感染者/艾滋病人中，异性性传播93,575例（69.6%）；同性性传播34,358例（25.5%）；注射毒品传播4,269例（3.2%）；母婴传播592例（0.4%）；性接触加注射毒品传播316例（0.2%）；既往输血及使用血制品传播4例（0.003%）；既往采血浆传播2例（0.001%）；传播途径不详1,396例（1.0%）[9]。目前临床上，性传播已逐渐替代血液传播，成为目前HIV传播的主要途径。艾滋病无症状期患者及HIV感染者因其他疾病在接受临床治疗时，极容易出现误诊或漏诊的情况，不仅会导致患者的治疗时间出现延误，且极可能导致患者因治疗方法的错误出现病情加重的严重后果。医务人员在诊疗过程中出现职业暴露的情况不可避免，当引发职业暴露的对象是艾滋病患者及HIV感染者时，此时发生漏诊或者误诊，发生职业暴露的医务人员就不能得到及时服药进行干预治疗，医务人员存在被感染的风险[10]。因此，对艾滋病患者进行准确的诊断显得尤为重要。

目前世界范围内对于艾滋病的治疗尚无特定的有效治疗方法，我国临床上主要使用口服抗病毒药物进行防治[11]，口服抗病毒药物对于早期HIV感染者的治疗具有明显效果，能延缓发病时间，延长生命周期，提升生存质量[12]。也正是因此，对患者进行早期的检测以及筛选，对于临床治疗艾滋病患者及HIV感染者有着极重要的意义。对患者进行HIV抗体检测，对于更好地对患者进行诊断、治疗及预防均有着极大的促进以及指导作用，可以更好为临床上的诊断工作提供参考依据，目前艾滋病检测初筛实验室较为常用的HIV抗体检测方法主要为酶联免疫法与胶体金法，两种检测方法均具有较高的灵敏度以及特异性，且两种检测方法的操作也较为简单。通过此次历时一年多对1,752份血清标本进行的对比试验结果，酶联免疫法的检测阳性率与胶体金法相比无明显差异（P＞0.05）。艾滋病检测初筛实验室在进行HIV抗体检测时，需要检验人员根据标本量大小等实际情况选择适合的检测方法。

值得一提的是，在整个研究试验过程中需要做好全程质量控制工作。从受试患者的准备、标本的采集、试验过程中、试验后数据收集等步骤做好全程质量控制，确保试验结果的准确性。对酶联免疫法或胶体金法任意一种方法检测为阳性（有反应）或者两种检测均为阳性（有反应），均按照《全国艾滋病检测技术规范（2015年修订版）》要求进行复检试验，复检试验结果符合送艾滋病检测确证实验室进行补充实验的，均按要求送检。

综上所述，对患者采取酶联免疫法与胶体金法进行HIV抗体检测，所取得检测结果相比较并无明显的差异，两种检测方法的检测结果效果显著，且对于临床进行艾滋病患者及HIV感染者诊断有着极大意义，可加强对患者的诊断准确性，提高患者的治疗效果，在今后临床对HIV抗体进行检测的工作中均可进行广泛应用。

参考文献

[1]郝阳, 崔岩, 孙新华. “四免一关怀”政策实施十年来中国艾滋病疫情变化及特征分析[J]. 中华疾病控制杂志, 2014, 18(5):369-374.

[2]周青华. 艾滋病传播途径及防治措施研究进展[J]. 中外健康文摘, 2012(41): 389-391.

[3]河南省艾滋病防治协会. 艾滋病抗病毒药物治疗相关科普知识(一)[J]. 家庭医学(下), 2017(3): 62-63.

[4]唐钧, 陈善昌. 酶联免疫法与胶体金法检测艾滋抗体应用评价[J]. 华夏医学, 2014, 27(3): 45-47.

[5]人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)说明书.2016年版. 北京万泰生物药业股份有限公司.

[6]人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒(胶体金法)使用说明书.2016年版. 英科新创(厦门)科技有限公司.

[7]曹玮. 临床免疫检测中存在的问题及对策分析[J]. 白求恩军医学院学报, 2012, 10(4): 314-315.

[8]中国疾病预防控制中心. 全国艾滋病检测技术规范(2015年修订版)[S]. 2015.

[9]中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心性病控制中心. 2017年12月全国艾滋病性病疫情[J]. 中国艾滋病性病,2018, 24(4): 321.

[10]王豪, 刘丁, 陈萍, 等. 医务人员血源性职业暴露监测分析与防护对策[J]. 重庆医学, 2010, 39(24): 3329-3330.

[11]中华医学会感染病学分会艾滋病学组. 艾滋病诊疗指南(2015版)[J]. 中华传染病杂志, 2015(10): 577-593.

[12]金艳涛, 蒋自强, 郭会军, 等. 无症状期HIV感染者生存质量评价[J]. 中国全科医学, 2012, 15(35): 4040-4042.