非小细胞肺癌患者血清MASP-2水平变化及其与其他肿瘤标记物的关联

肺癌的早期症状与肺部良性疾病类似，因此早期肺癌的发现比较困难。研究者正不断寻找新的检测方法，以提高肺癌的早期检出率[1-2]。人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2（mannan-bingding lectin associated serine protease 2，MASP-2） 是补体系统凝集素激活途径的关键酶，在补体激活的凝集素途径中发挥至关重要的作用[3]。血清MASP-2含量的变化可能与肿瘤、感染性疾病相关[4]。选择我院2014年6月—2016年6月收治的非小细胞肺癌96例，对其临床资料进行相关性分析，并与肺部感染（未治疗）患者和健康体检者进行比较，旨在探讨肺癌患者血清MASP-2水平变化与肺癌以及其他肿瘤标志物的关系，为肺癌的辅助诊断提供依据。

As mentioned,two design optimizations are done in this study.The first optimization is a deterministic optimization,and the second is a robust optimization.The considered objective functions and constraints are the same for both design optimizations.

1 资料与方法

1.1 一般资料 非小细胞肺癌患者（以下简称肺癌）96例，男性60例，女性36例，平均年龄65.76±6.87岁。纳入标准：（1）UICC肺癌TNM分期（2009版）为临床I期、II期。（2）心、肺功能未见明显异常。（3）术前胸部CT、颅脑MRI、全腹彩超、纤维支气管镜等检查无明显转移性病灶。（4）术后病理证实为非小细胞肺癌。排除标准：（1）胸部CT示肿瘤直径＞5 cm。（2）纵隔有明显肿大淋巴结（直径大于1 cm）。（3）严重肝、肾功能损害。收集我院体检中心的健康体检者共96例，其中男性61例，女性35例，平均年龄65.06±5.99岁；肺部感染（未治疗）患者96例，其中男性58例，女性38例，平均年龄66.41±6.92岁。三组间的年龄、性别差异无统计学意义，具有可比性（P均＞0.05）。所有研究对象均签署知情同意书，并通过伦理委员会批准。

1.2 检测方法 收集所有研究对象外周血标本10 mL，2 500 r/min离心8 min后取血清，置于EP管中，80℃低温冰箱保存并统一检测。采用ELISA法检测血清MASP-2水平，试剂盒购自上海沪峰生物工程有限公司，具体操作步骤严格按说明书。另外，对肺癌患者检测肿瘤标志物，其中血清铁蛋白（SF）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原 125（CA-125）的检测采用贝克曼DXI800全自动发光仪及配套试剂盒，严格按照说明书的操作步骤进行操作。同时记录患者TNM分期和是否存在淋巴结转移等临床信息。

1.3 统计学处理 采用SAS 9.2统计学软件进行数据分析。对血清MASP-2水平以及肿瘤标记物检测数据中符合正态分布的采用均数±标准差表示，不符合正态分布的采用中位数+四分位数间距表示。符合正态分布的数据两组间比较使用t检验，三组间比较使用单因素方差分析，对不符合正态分布的资料采用Wilcoxon秩和检验，率的比较使用卡方检验，相关分析采用spearman相关分析法。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

临床上常用CEA、SF、CA-125等肿瘤标记物作为诊断早期肺癌的方法，但是敏感性和特异性尚待提高[5-6]。因此，寻找较好的能用于早期诊断并检测肿瘤病情发展的血清标记物十分重要。

在37℃，72 h培养时间条件下，研究不同接种量对酯化力的影响，实验结果见图5。由图5可知，随着接种量的增加，酯化力先增高后降低。接种量为1%时，发酵产物的酯化力较低。当接种量为2%时，麸曲的酯化力最高，与1%接种量的发酵产物相比有了明显的提高。之后增大菌种的接种量，发酵产物的酯化力没有明显的提高。

 

表1 不同临床特征的肺癌患者血清MASP-2水平的比较

  

分类 例数 血清MASP-2（ng/mL） Z值 P值性别 男 60 448.4（256.3～693.4） 0.415 0.755女36 410.7（212.3～655.7）年龄 ≥60岁 67 481.5（343.4～703.9） 5.172 0.002＜60 岁 21 381.5（284.3～683.7）临床分期 I期 42 349.3（198.9～556.4） 10.323 ＜0.001 II期 54 513.9（351.4～754.7）淋巴结转移 发生 28 555.1（378.4～792.1） 14.432 ＜0.001未发生 68 335.9（204.7～610.1）

2.3 肺癌患者血清MASP-2水平与肿瘤标记物的关系 肺癌患者血清MASP-2水平的中位数为435.2 ng/mL，将高于中位数者归入MASP-2水平较高组，低于中位数者归入MASP-2水平较低组。两组血清CEA水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），MASP-2水平较高组的铁蛋白和CA-125水平显著高于MASP-2水平较低组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。血清MASP-2水平与血清铁蛋白和CA-125水平有较好的相关性（r=0.653，0.554，P 均＜0.001）。见表 2。

2.2 不同临床特征肺癌患者血清MASP-2水平比较 肺癌患者血清MASP-2水平在男性与女性患者间差异无统计学意义（P＞0.05)，年龄≥60岁患者血清MASP-2水平高于年龄＜60岁患者，TNM II期患者血清MASP-2水平高于I期，发生淋巴结转移患者显著高于未发生淋巴结转移患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表 1。

 

表2 肺癌患者中血清MASP-2水平与肿瘤标记物的关系

  

组别 例数 铁蛋白（ng/mL） CEA（U/L） CA-125（U/L）血清MASP-2水平较高组 48 386.5（132.4～693.2） 45.6±10.4 35.6±9.3血清MASP-2水平较低组 48 290.4（109.4～355.3） 46.2±11.2 22.3±7.4 t或Z值 9.321 0.653 11.332 P值 ＜0.001 0.612 ＜0.001

3 讨 论

2.1 血清MASP-2水平比较 肺癌患者、肺部感染者、健康体检者血清MASP-2分别为424.4±76.4 ng/mL、309.3±51.2 ng/mL、221.2±46.5 ng/mL，肺癌患者血清MASP-2水平显著高于肺部感染、健康体检者（F=14.5，P＜0.001)。

我国企业在激烈的市场竞争中，要想有效地提升企业发展竞争力，应重视会计成本核算，以此提升企业的经济利益，促进企业健康发展，但在我国大部分企业中，一部分会计成本核算人员素质较低，难以在实际工作中运用正确的计算方式。同时，缺乏职业胜任力，难以对企业的未来发展制定合理的经济计划，从而影响我国企业的发展。除此之外，企业中成本核算会计人员的素质较低，严重影响成本核算工作效率，在短时间内难以向企业领导提供准确率较高的成本核算结果，从而影响企业领导的决策，降低企业的经济水平，难以参与激烈的市场经济竞争。

MASP-2是目前发现能直接启动补体级联反应的关键蛋白酶，是补体激活的凝集素途径中的关键因素。在免疫防御过程中，MASP-2能与MBL结合，激活补体以达到杀伤细胞、清除抗原的目的，另外还具有调节炎症反应、促进细胞凋亡以及调理吞噬等作用[7]。健康人群MASP-2血清浓度长期稳定，不受性别、运动、生理期等因素的影响，但不同种族人群间的MASP-2血清浓度并不完全相同。非洲人MASP-2血清平均浓度较低，为 196 ng/mL（8～926 ng/mL），中国香港为 262 ng/mL（52～720 ng/mL），美洲印第安人290 ng/mL（35～1399 ng/mL），白种人可达 416 ng/mL（125～1152 ng/mL）[8]。另外有研究发现，儿童血清MASP-2浓度可能高于成年人[9]。因此，在做研究比对时，各实验室应建立各自不同的血清MASP-2参考值范围。

关于血清MASP-2水平与肿瘤的研究中，有文献报道甲状腺癌患者的血清MASP-2水平明显增高，但未分析其水平变化与疾病转归的关系[10]。Swierzko等[11]对卵巢癌的研究认为，卵巢癌患者血清和肿瘤组织中MASP-2的表达水平明显高于健康对照组，并且与患者的预后密切相关，表明MASP-2可能通过补体激活的凝集素途径参与卵巢癌的疾病过程。本研究旨在探讨MASP-2血清水平与肺癌患者临床特征与肿瘤标志物的关系，发现肺癌患者血清MASP-2水平显著高于肺部感染和健康体检者，并且MASP-2含量与年龄、病程以及是否淋巴结转移有关，表明血清MASP-2水平与肺癌患者临床特征和病程进展有关。

目前，应用于肺癌的肿瘤标记物包括CEA、CA125、SF、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、鳞状细胞癌抗原（SCC）等多种[12]，分析MASP-2与其他肿瘤标记物的相关性有助于评价其在肿瘤诊断与病情监测中的作用。我们的研究结果表明肺癌患者血清MASP-2水平与血清铁蛋白、CA-125呈较好的正相关，提示通过MASP-2水平的检测有助于早期诊断肺癌，并进行较好的病情监测。由于血清MASP-2水平与早期肺癌患者的肿瘤分期与淋巴结转移密切相关，因此，本研究认为血清MASP-2可作为一个有效监测肺癌的潜在标记物，但MASP-2是否能成为肺癌的预后影响因素尚待进一步研究明确。

[参考文献]

[1]Schneider J.Early detection of lung cancers-Comparison of computed tomography,cytology and fuzzy-based tumor markers panels［J］.Cancer Biomark，2010，6（3-4）：149-162.

[2]Oyama T，Osaki T，Baba T，et al.Molecular genetic tumor markers in non-small cell lung cancer［J］.Anticancer Res，2005，25（2B）：1193-1196.

[3]Frauenknecht V，Thiel S，Storm L，et al.Plasma levels of mannan-binding lectin （MBL）-associated serine proteases（MASPs）and MBL-associated protein in cardio-and cerebrovascular diseases［J］.Clin Exp Immunol，2013，173（1）：112-120.

[4]Ytting H，Christensen IJ，Steffensen R，et al.Mannan-binding lectin （MBL）and MBL-associated serine protease 2（MASP-2）genotypes in colorectal cancer［J］.Scand J Immunol，2011，73（2）：122-127.

[5]Vargas AJ，Harris CC.Biomarker development in the precision medicine era:lung cancer as a case study［J］.Nat Rev Cancer，2016,16（8）：525-537.

[6]Hayes SA，Haefliger S，Harris B，et al.Exhaled breath condensate for lung cancer protein analysis：a review of methods and biomarkers［J］.J Breath Res，2016，10（3）：034001.

[7]Hertle E，Arts IC，Van Der Kallen CJ，et al.Distinct longitudinal associations of MBL，MASP-1，MASP-2，MASP-3，and MAp44 with endothelial dysfunction and Intima-Media thickness：the cohort on diabetes and atherosclerosis Maastricht（CODAM） study［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2016，36（6）：1278-1285.

[8]Ytting H，Christensen IJ，Thiel S，et al.Biological variation in circulating levels of mannan-binding lectin （MBL） and MBL-associated serine protease-2 and the influence of age，gender and physical exercise［J］.Scand J Immunol，2007，66（4）：458-464.

[9]Sallenbach S，Thiel S，Aebi C，et al.Serum concentrations of lectin-pathway components in healthy neonates，children and adults：mannan-binding lectin（MBL），M-，L-，and H-ficolin，and MBL-associated serine protease-2 （MASP-2）［J］.Pediatr Allergy Immunol，2011，22（4）：424-430.

[10]石燕萍，刘阁玲，张慧芹，等.MASP-2在甲状腺肿瘤中的表达及其临床意义［J］.中国现代医药杂志，2010，12（10）：4-6.

[11]Swierzko AS，Szala A，Sawicki S，et al.Mannose-Binding lectin （MBL） and MBL-associated serine protease-2（MASP-2）in women with malignant and benign ovarian tumours［J］.Cancer Immunol Immunother，2014，63（11）：1129-1140.

[12]Oremek GM，Sauer-Eppel H，Bruzdziak TH.Value of tumour and inflammatory markers in lung cancer［J］.Anticancer Res，2007，27（4A）：1911-1915.