Toll样受体的免疫调节在口腔疾病中的研究进展

固有免疫(innate immunity)是指机体本身的非特异性天然免疫防御功能，又称为非特异性免疫(nonspecific immunity)。固有免疫系统可视为机体抵御病原微生物的第一道防线，在机体防御中具有重要意义。模式识别受体(pattern-recognition receptors，PRRs)在固有免疫中识别病原微生物表面的病原模式相关分子(pathogen-associated molecular pattern，PAMPs)并启动固有免疫应答。PAMP主要包括革兰阴性菌的脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)；革兰阳性菌的肽聚糖、磷壁酸、脂磷壁酸；分枝杆菌的脂糖等[1]。Toll样受体(Toll-like receptors，TLRs)是一类已被广泛研究的PRR家族。TLRs信号传导影响多种生物过程，包括抗原呈递、细胞存活、炎症和直接的抗微生物反应，被公认为抗病毒免疫的第一线[2]。

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1　Toll样受体简介

Toll样受体是1985年首次发现的I型跨膜蛋白受体，通过识别并结合相应的PAMPs，激活其信号转导途径，诱导某些免疫效应分子，包括炎性细胞因子表达，从而激发获得性免疫应答[3]。迄今为止，已经发现人体内有10余种TLRs[4]。其中TLR4主要识别革兰氏阴性菌的LPS；TLR2可识别革兰氏阴性菌的LPS和革兰氏阳性菌的肽聚糖，并与TLR1,6等形成二聚体识别支原体脂肽、真菌的酵母聚糖；TLR3识别双链RNA和配体polyI:C；TLR5识别细菌鞭毛蛋白；TLR9识别包含未甲基化CpG基序的细菌DNA(CpGDNA)[5]。TLRs与配体结合后，结构发生二聚化，由此激发Toll/IL-1受体结构域结构区(Toll-IL-1 receptor domain，TIR)与胞内衔接分子的相互作用，从而激活信号传导。TLRs信号传导级联反应包括髓样分化因子88(myeloid differentiation primary-response protein 88，MyD88)依赖型以及MyD88非依赖型通路。前者为大部分TLR的免疫介导通路，后者目前仅发现为TLR4的非主要介导通路[6]。

TLRs在机体中分布广泛，大约20余种细胞表面均有表达且参与了免疫反应的调节。TLR1可在单核细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、自然杀伤(naturalkiller，NK)细胞上表达；TLR2、TLR4、TLR5只在髓源性细胞上表达；TLR3只特异性表达于树突状细胞；TLR7在肺、脾、胎盘等组织优势表达；TLR8高度表达于肺、外周血白细胞；TLR9、TLR10和TLR11表达于富含免疫细胞的组织，如脾、淋巴结和外周血等[1]。TLRs在口腔内各种组织上大量表达并介导调节大部分炎症相关口腔疾病，如龋病、牙髓炎、牙周炎、口腔扁平苔藓和口腔鳞癌等。其中TLR2、TLR4起主要调节作用，TLR3、TLR1、TLR9等也有少量表达。

煤岩结构构造：煤的原始结构多已破坏，而呈类似砂岩的碎屑砂状结构(煤岩碎块大小0.05～3 mm)，矿物杂质的含量稍多；破坏较严重者，可呈类似糜棱岩的糜棱结构。仅有部分煤岩残余原始结构，为均匀状结构，块状结构，其矿物杂质含量较少。

2　Toll样受体与龋病牙髓炎

屈哨兵：这是一个比较现实的问题，主要涉及教育的眼光和教育制度设计。事实上，国家也注意到了这个问题。义务教育阶段学校的校长标准有6大块60条，它其实就是做一名合格校长的基本要求，也界定了一名校长的基本努力范围。

深龋和牙髓炎早期，牙髓细胞在LPS刺激作用下，TLR4受体与LPS结合，介导成纤维细胞、成牙本质细胞及内皮细胞分泌细胞因子如肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)等，参与牙髓炎症反应，调节免疫应答[9]。早期，TLR4蛋白表达上调，可能为牙髓细胞提供即时性保护，随后，成纤维细胞、成牙本质细胞及血管内皮细胞大量合成TLR4，进入细胞核，参与细胞内蛋白质合成和变性蛋白质的降解，减轻LPS对细胞的损伤。在炎症晚期，TLR4随炎症发展而减弱，则显示TLR4积极参与牙髓损伤与修复。尽管当应答LPS的刺激时，TLR2与TLR4在细胞中都是高表达，如外周血白细胞、巨噬细胞和单核细胞，但与TLR2相比，TLR4的免疫应答细胞数量更少[10]。虽然TLR2不在革兰氏阴性菌的识别中起主要作用，但部分PAMPs仍通过TLR2依赖性途径激活宿主免疫细胞。TLR2能与TLR1或TLR6形成功能性复合体，识别革兰氏阴性菌脂蛋白脂肽、革兰氏阳性菌肽聚糖及脂磷壁酸等，使成牙本质细胞中TLR2/TLR1复合体活化[11]。Akira等[12]报道，TLR2形成复合体活化后，通过信号通路MyD88诱导激活IKK复合物引起抑制性核因子-κB(nuclear factor-κB，NF-κB)蛋白特殊位点的磷酸化降解蛋白酶体，激活转录因子NF-κB，使之转移至细胞核内与靶基因启动子区域结合，转录诱导IL-1β、IL-6、IL-8等多种炎症因子的产生。

研究提示TLR1可与TLR2形成复合二聚体，而且正常牙髓与炎症牙髓组织中TLR1表达与细胞分布部位及功能状态相关[13]。TLR1在牙髓组织免疫应答过程中起到较大作用，可能通过诱发免疫应答从而引起血管内皮细胞等免疫细胞活化以避免病原微生物入侵，并在牙髓及牙本质免疫复合体免疫防御反应中发挥重要作用。炎症后期，当细菌感染时成牙本质细胞表达的TLR9特异性地识别细菌DNA，活化后通过特异的细胞内信号转导途径，活化转录因子NF-κB，调控牙本质涎磷蛋白(dentinsialo-phosprotein，DSPP)基因表达，成牙本质样细胞向前期牙本质分化，形成第三期牙本质，从而参与牙髓损伤修复。

洞挖对围岩而言就是卸荷——应力释放——失衡，“失衡”意味着可能产生“失稳”，就Ⅳ类围岩而言常发现岩体松动，岩石掉落失稳现象，洞顶未满足设计的“城门洞型”。施工须严格遵循新奥法“少扰动、早喷锚、快封闭、勤测量”原则，加长锚杆到达“韦斯曼”承载圈，如图1，支护衬砌距离掌子面越近越好，两者最大距离为：lmax≤1.5Φ（Φ 为拱直径），如图2，例：当Φ=2 m 时，lmax≤3 m。

3　Toll样受体与牙周炎

[1]　Jin MS, Lee JO. Structures of the toll-like receptor family and its ligand complexes[J].Immunity,2008,29(2):182-191.

随着酒店业竞争加剧，酒店之间在客户资源的争抢上也愈发激烈，导致酒店的利润空间不断被压缩。张潇潇（2103）指出必需将更加行之有效的信息化管理运用于酒店的管理中，对酒店的经营空间进行广泛的开拓，实现运营成本的进一步降低。其认为酒店管理系统的合理运用，不仅可以对大量的信息进行有效的管理，还可以将先进的管理观念引进来，从而不断地推动工作效率及服务质量的提升，实现酒店内部管理体制的不断完善，提高酒店决策水平、经济效益以及关系效益，最终实现酒店竞争力的提升[9]。

TLR3配体是病毒的双链RNA，当机体细胞坏死或凋亡后释放mRNA。其他RNA在形成双链结构时，也可成为TLR3的配体。TLR3具有启动炎性信号转导、活化补体、引发细胞吞噬和诱导凋亡等功能，从而参与机体的抗病毒免疫反应。TLR5特异性介导细菌鞭毛蛋白的免疫应答。鞭毛蛋白是革兰氏阴性厌氧杆菌鞭毛的主要成分，其具有比LPS更强的致炎作用，是细菌运动的主要动力，对病原菌的粘附和入侵也起着重要作用。研究发现，在牙周袋中存在幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori，HP)，而TLR5能特异性识别HP的鞭毛蛋白[19]。TLR9主要表达于免疫效应细胞中，在抗感染免疫中具有重要作用[20]。研究发现[21]，随着炎症发展，菌斑中细菌数量的增加及细菌间的竞争可能导致部分细菌破裂，从而释放出大量DNA，促使牙龈组织内TLR9表达量显著升高。因此，TLR3,5,9均参与牙龈及牙周炎症发生发展的过程。

4　Toll样受体与口腔鳞状细胞癌

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤。近年来发现TLR4/NF-κBp65通路的过表达对OSCC的发生发展可能起到促进作用，其可能原因是该通路参与并影响了细胞间黏附蛋白、细胞内周期蛋白等关键蛋白的合成，并且调控了抗凋亡基因的表达，从而使OSCC侵袭性变强，分化程度变差并且出现淋巴结的转移[22]。同时，TLR2参与了多种生理功能和病理过程，Frantz等[23]发现通过阻断TLR2会增强氧化应激导致的大鼠心肌细胞凋亡，TLR2激动剂可以作用于DC表面的TLR2分子，使CD80、CD86等共刺激分子表达上调，并诱导其产生抗肿瘤细胞因子如TNF-α，达到抗肿瘤的目的，有效地延长肿瘤病人的存活时间。TLR3与其配体分子polyI:C的结合能够引起细胞内的级联反应，导致下游信号通路上一系列效应分子被激活，如NF-κB、c-Jun氨基末端激酶(c-JunN-terminal kinase, JNK)和干扰素调节因子(interferonregulatory factors, IRFs)等。这些信号分子在肿瘤细胞的生长和凋亡过程中都发挥着重要的作用。头颈部鳞状细胞癌、鼻咽癌、喉癌、黑色素瘤、肺癌、肝癌及乳腺癌等肿瘤细胞均发现有TLR3基因和蛋白的表达，这些肿瘤细胞中TLR3的激活能够通过不同途径促使其自身发生凋亡而抑制肿瘤的生长。

5　Toll样受体与口腔扁平苔藓

口腔扁平苔藓(oral lichen planus，OLP)是一种慢性炎症性疾病，病因不清，一般认为是T淋巴细胞介导的免疫反应。持续的T淋巴细胞浸润导致该炎性病变迁延不愈，革兰氏阴性菌在OLP病灶部位显著增多，能识别LPS的TLR4表达也相应增多。Yana[24]的研究发现OLP组织中，TLR4的免疫组化阳性率较正常组织显著增高，在LPS诱导建立的OLP细胞模型中，TLR4的基因和蛋白表达均明显增强。Siponen[25]的研究也证实TLR4在OLP组织中表达显著增高，特别是在萎缩糜烂型中，基底层较中间层、表层及黏膜下炎症浸润层显著增高。在OLP病灶中革兰氏阴性菌和脱落上皮激活了TLR4 mRNA转录，TLR4蛋白相应表达增多，识别病原相关分子并与相应受体结合，启动和激活NF-κB通路，促进TNF-α表达增多。而TNF-α的大量表达导致T淋巴细胞浸润基底层，增多的T淋巴细胞又分泌TNF-α，导致黏膜局部炎症的发生和病损迁延不愈。TLR9启动子区rs187084位点C/T单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism，SNP)可增加TLR9的转录活性，促进炎症反应[26]。OLP的易感性可能与TLR9基因多态性有关，TLR4的表达也与OLP治疗效果和预后相关。

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6　Toll样受体与细胞成骨分化

错颌畸形是口腔中依靠骨吸收和骨改建治疗的常见疾病，慢性牙周炎和根尖周炎是口腔中常见的累及骨组织的细菌感染性疾病，主要表现为骨组织的炎症性吸收。近年来Wnt信号通路是研究的热点，其在骨改建中起着重要的调节作用，可促进骨形成、抑制骨吸收。其中β-catenin是Wnt信号向细胞核传递过程中的重要信号分子，Wnt信号转导的关键是胞浆中是否存在结构稳定的可溶性β-catenin。成年人体内，β-catenin的缺失可降低成骨细胞的骨形成作用，增加破骨细胞的骨吸收作用，从而影响骨的生理功能[27]。Holmen等[28]研究发现，LPS可激活破骨样细胞中的TLR4，作用于破骨样细胞后，可下调Wnt信号分子β-catenin、LRP6 mRNA的表达水平。提示TLR4被激活后，可通过抑制Wnt信号通路中的信号分子而阻断Wnt信号转导，使其对骨组织的调控作用受到抑制。另有研究表明[29]表达于成骨细胞及破骨细胞上的TLR9的激活，可以诱导产生各种炎性因子如TNF-α和IL-1等。这些炎性因子协同作用可以抑制成骨细胞的成骨功能，促进破骨细胞活化，从而破坏骨改建的平衡，导致骨吸收。

7　小　结

TLRs是天然免疫的模式识别受体，具备多种生物学功能：如可促进细胞因子的合成与释放，诱发炎症反应及抗病毒感染，促使免疫细胞的成熟，促进免疫细胞表面表达病原相关分子等。研究发现[30]，TLRs诱导的固有免疫与炎症、感染、肿瘤及自身免疫性疾病密切相关，被认为是特异性免疫的启动器。人体包括口腔在内的各器官组织均存在TLRs，其是近年来炎症免疫治疗的研究热点，对TLRs进行深入研究可为今后探索疾病的发病机制提供另一思路，对于临床预防和治疗疾病具有重要意义。

[参　考　文　献]

牙周炎是由菌斑微生物所引起的牙周组织的慢性感染性疾病，可引起牙周袋的形成、进行性附着丧失和牙槽骨吸收，最终导致牙齿脱落。革兰氏阴性厌氧杆菌是牙周炎的主要致病菌，其通过LPS诱导牙周膜细胞产生炎症因子，在牙周病的病理过程中发挥重要作用。通过对人牙龈活体组织上皮细胞TLRs表达的检测，发现牙龈上皮细胞表达TLR2-6以及TLR9。在稳定环境下牙龈上皮表达的TLRs与牙表面菌斑细菌产物持续作用，该信号通路能抑制致病性感染并阻碍共生微生物穿透上皮屏障，从而维持了牙龈健康。

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龋病是在以细菌为主的多种因素作用下，牙体硬组织发生慢性进行性破坏的一种疾病，通常伴随革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌混合感染[7]。这些细菌及其产生的毒力因子沿着牙本质小管走行，入侵牙髓组织。LPS作为主要毒力因子，可有效地激活免疫系统，诱导髓系和其他系细胞释放炎症及抗炎因子，诱发宿主的炎症反应。随着龋病的发展，牙髓内部的牙髓干细胞可多向分化为受损细胞以补充和修复受损组织，这一过程被认为是牙髓组织参与的天然免疫反应[8]。根尖周组织抗原提呈细胞(antigen-presenting cells，APCs)通过对病原微生物PRRs进行特异性抗原识别，上调共刺激分子并分泌细胞因子，激活适应性免疫系统。

[2]　Hamonic G, Pasternak JA, Wilson HL. Recognizing conserved non-canonical localization patterns of toll-like receptors in tissues and across species[J]. Cell Tissue Res, 2018:1-11.

[11] Lee CC, Avalos AM, Ploegh HL. Accessory molecules for Toll-like receptors and their function[J].Nat Rev Immunol,2012,12(3):168-179.

[3]　Medvedev AE.Toll-like receptor polymorphisms, inflammatory and infectious diseases, allergies, and cancer[J].J Interferon Cytokine Res,2013,33(9):467-484.

[12] Akira S, Uematsu S, Takeuchi O. Pathogen recognition and innate immunity[J].Cell,2006,124(4):783-801.

[5]　Barton GM, Kagan JC, Medzhitov R.Intracellular localization of Toll-like receptor 9 prevents recognition of self DNA but facilitates access to viral DNA[J].Nat Immunol,2006,7(1):49-56.

有研究发现[14-15]，慢性牙周炎病人的唾液和血浆中TLR4和TLR2的表达水平均显著增高。牙周膜细胞上TLR4被LPS特异性识别后，其下游信号通路得以激活，并表达各种炎症因子如TNF-α和IL-1β等。研究发现[16]，在正常情况下牙周膜细胞仅有少量TNF-α、IL-1β表达，表明LPS刺激牙周膜细胞后，TLR4表达上调，大量炎症因子释放。抑制TLR4的表达能有效抑制炎症因子IL-6、TNF-α的产生[17]。TLR2能识别PAMPs，如以牙龈卟啉单胞菌为代表的内毒素、肽聚糖和脂磷壁酸等[18]。TLR2与TLR4大量表达，造成炎症损伤，参与牙周炎的发生和发展。

[6]　Oosenbrug T, van de Graaff MJ, Ressing ME, et al. Chemical tools for studying TLR signaling dynamics[J]. Cell Chem Biol, 2017, 24(7):801-812.

田间初见玉米锈病病叶时，用20%三唑酮乳油900mL/hm2，或12.5%烯唑醇 (禾果利)450～600g/hm2对水喷雾防治，视病情酌情补治。玉米螟虫穗率达10%或花丝有虫50头/百穗时，先剪去穗顶花丝，再用4.5%高效氯氰菊酯乳油750～900mL/hm2对水喷玉米穗顶。

[7]　Desai SV, Love RM, Rich AM, et al. Antigen recognition and presentation in periapical tissues: a role for TLR expressing cells?[J].Int Endod J,2011,44(2):87-99.

[8]　Liu Y, Gao Y, Zhan X, et al. TLR4 activation by lipopolysaccharide and streptococcus mutans induces differential regulation of proliferation and migration in human dental pulp stem cells[J].J Endod, 2014, 40(9):1375-1381.

[9]　Sun Y, Shu R, Zhang MZ, et al. Toll-like receptor 4 signaling plays a role in triggering periodontal infection[J].FEMS Immunol Med Microbiol,2008,52(3):362-369.

目前北方农村生活方式以直接燃烧为主，耗能在冬季仅能满足10℃左右的室温，这种缺能有浪费能源的局面在农村仍然还很严重，大量生物质直接燃烧不仅染污了环境，而且也抑制了生态环境的改善，农村生活用能方式的改变，已是社会进步和发展的必然。

[10] Jang JH, Shin HW, Lee JM, et al. An overview of pathogen recognition receptors for innate immunity in dental pulp[J/OL]. Mediators Inflamm, 2015[2017-10-11].https://www.hindawi.com/journals/mi/2015/794143/

式中：mn为应力响应谱的n阶矩；Sσ(ω)为应力响应谱；H为传递函数；S(ω)为波能谱；σ为短期海况瑞利分布均方差；f0为平均跨零频率。

MMC由于直流侧没有集中布置的电容器，为保持直流母线电压正负极对称，需在直流侧或换流变二次侧设置接地点。常见接地方式主要有直流侧经电阻接地、交流侧构造接地点或利用换流变压器接地。

[4]　Beutler B. Inferences, questions and possibilities in Toll-like receptor signalling[J].Nature,2004,430(6996):257-263.

[13] Plantinga TS, Johnson MD, Scott WK, et al. Toll-like receptor 1 polymorphisms increase susceptibility to candidemia[J].J Infect Dis,2012,205(6):934-943.

[14] Promsudthi A, Poomsawat S, Limsricharoen W. The role of Toll-like receptor 2 and 4 in gingival tissues of chronic periodontitis subjects with type 2 diabetes[J]. J Periodontal Res, 2014, 49(3):346-354.

[15] Song B, Zhang YL, Chen LJ, et al. The role of Toll-like receptors in periodontitis[J]. Oral Dis, 2016, 23(2):168.

[16] Beklen A, Sarp AS, Uckan D, et al. The function of TLR4 in interferon gamma or interleukin-13 exposed and lipopolysaccharide stimulated gingival epithelial cell cultures[J]. Biotech Histochem, 2014, 89(7):505-512.

[17] 张帆, 余国玺, 王力锋. miR-495-3p对LPS刺激人牙周膜细胞增殖及炎性因子表达的影响[J]. 口腔生物医学, 2017, 8(2):86-89.

[18] Mahanonda R, Pichyangkul S. Toll-like receptors and their role in periodontal health and disease[J].Periodontol 2000,2007,43(1):41-55.

[19] Gewirtz AT, Yu Y, Krishna US, et al. Helicobacter pylori flagellin evades toll-like receptor 5-mediated innate immunity[J]. J Infect Dis, 2004, 189(10):1914-1920.

[20] Krieg AM. Therapeutic potential of Toll-like receptor 9 activation[J].Nat Rev Drug Discov,2006,5(6):471-484.

[21] Chen YC, Liu CM, Jeng JH, et al. Association of pocket epithelial cell proliferation in periodontitis with TLR9 expression and inflammatory response[J]. J Formos Med Assoc, 2014, 113(8):549-556.

[22] Conroy H, Marshall NA, Mills KH. TLR ligand suppression or enhancement of Treg cells? A double-edged sword in immunity to tumours[J].Oncogene, 2008,27(2):168-180.

[23] Frantz S, Kelly RA, Bourcier T. Role of TLR-2 in the activation of nuclear factor kappaB by oxidative stress in cardiac myocytes[J].J Biol Chem,2001,276(7):5197-5203.

[24] Ge Y, Xu Y, Sun W,et al. The molecular mechanisms of the effect of Dexamethasone and Cyclosporin A on TLR4 /NF-kappaB signaling pathway activation in oral lichen planus[J].Gene,2012,508(2):157-164.

[25] Siponen M, Kauppila JH, Soini Y, et al. TLR4 and TLR9 are induced in oral lichen planus[J].J Oral Pathol Med,2012,41(10):741-747.

[26] Bharti D, Kumar A, Mahla RS, et al. The role of TLR9 polymorphism in susceptibility to pulmonary tuberculosis[J].Immunogenetics,2014,66(12):675-681.

[27] Glass DA, Karsenty G. In vivo analysis of Wnt signaling in bone[J].Endocrinology,2007,148(6):2630-2634.

[28] Holmen SL, Zylstra CR, Mukherjee A, et al. Essential role of beta-catenin in postnatal bone acquisition[J].J Biol Chem,2005,280(22):21162-21168.

[29] Yamano E, Miyauchi M, Furusyo H, et al. Inhibitory effects of orally administrated liposomal bovine lactoferrin on the LPS-induced osteoclastogenesis[J].Lab Invest,2010,90(8):1236-1246.

[30] Lee NY, Lee HY, Lee KH, et al. Vibrio vulnificus ⅡpA induces MAPK-mediated cytokine production via TLR1/2 activation in THP-1 cells, a human monocytic cell line[J].Mol Immunol,2011,49(1/2):143-154.

由于药理学要求学生具有生理学、病理生理学等先修课程的良好基础，综合性较强，因此课程较之单一课程的难度大。在讲授药理学的过程中，往往因为学生先修课程基础较单薄，授课教师不得不花一定时间补充和回顾基础知识，不但占用药理学的授课时间，也会打乱教学安排，严重影响教学效果[9]。因此，确保学生对生理学、病理生理学等课程有较扎实的理论基础是首先要解决的问题。