某规模猪场免疫抗体水平及抗原检测分析

目前我国规模化猪场几乎都有自家的猪场疫病免疫程序，对重要传染病进行有计划的免疫接种，这对防控烈性传染病的暴发起到了至关重要的作用。但仍有部分猪场疫情不稳定，尤其是在保育阶段常出现或大或小的问题。针对猪群的不稳定，为查找原因，一般可采血清样本进行免疫抗体水平的监测，可以了解注射疫苗免疫的免疫效果；同时对病死猪淋巴结、肺脏和脾脏等病料进行重要疫病病原检测，对判断疫情具体重要参考意义。2017年3月，江西省某规模猪场保育猪群出现疫情，随即送检了31份血清样本和3头患病仔猪到江西农业大学兽医院，分别进行了重要疫病免疫抗体水平和抗原的检测。发现其猪瘟抗体、伪狂犬总抗体、蓝耳病毒抗体均很高；但伪狂犬野毒抗体阳性率也在75%以上，蓝耳抗体参差不齐。病原基因检测结果，未检测到猪瘟病毒和变异蓝耳病毒基因，但检测到伪狂犬病毒基因和经典蓝耳病毒基因。初步判断该病疫情与蓝耳、伪狂犬野毒感染相关，现将其具体分析报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清样本：31份全血样本，来自猪场经产母猪（19 头）、公猪（6 头）、产床仔猪（3 头）和保育猪（3头）。离心，弃沉淀，取上清为待检测血清样本。

1.1.2 病料：无菌操作采集病死保育猪脾脏、肺脏以及淋巴结等病料，一共3头。

1.1.3 抗体检测试剂盒：试剂盒均购自美国Idexx公司。

猪瘟抗体检测ELISA试剂盒，批号：99-43220-H641；猪蓝耳抗体检测ELISA试剂盒，批号：40959-H461，猪伪狂犬总抗体（gB抗体）检测ELISA试剂盒，批号09732-EM176，猪伪狂犬野毒抗体（gE抗体）检测ELISA试剂盒，批号：09836-GM453。

1.1.4 细菌分离所需鲜血培养基，由实验室参照文献［1］自行配制并保存。

1.1.5 病毒基因PCR检测引物，由江西农业大学兽医院设计并保存。

1.1.6 PCR检测试剂，购自Shanghai Promega公司产品。

3.4 本次疫情的控制，还是通过综合措施得以实现。针对疫情，主要采取加强饲养管理的基础上，进行药物保健，同时进行适度蓝耳疫苗和伪狂犬疫苗的免疫，最终将疫情控制。但伪狂犬野毒感染在普遍的情况下，猪群仍是处于比较危险状况中，建议猪场对后备种猪进行伪狂犬病的逐步净化，才是长久之计。

1.2 方法

3.1 本次对送检31份全血样本提取血清，分别检测了猪瘟抗体、伪狂犬总抗体和野毒抗体、蓝耳病毒抗体；对3头仔猪分别检测了猪瘟病毒、经典蓝耳病毒、变异蓝耳病毒、伪狂犬病毒和圆环病毒。结果：猪瘟抗体全群合格率77.42%、平均阻断率57.16%、变异系数31.88%；蓝耳抗体阳性率93.55%、平均S/P值1.308、变异系数55.72%；伪狂犬总抗体（gB抗体）全合格，合格率100%；伪狂犬野毒抗体 （gE抗体）阳性率77.42%、平均S/N值0.326、变异系数108.18%。猪瘟、变异蓝耳全阴性；伪狂犬2头阴性、1头阳性；经典蓝耳病毒和圆环病毒全阳性。

1.2.2 免疫血清抗体检测：参照试剂盒说明书进行操作。

1.2.3 病料中病毒基因检测：DNA病毒采用PCR方法；RNA病毒采用RT-PCR方法。

对伪狂犬病毒、圆环病毒等DNA病毒，采用PCR方法进行检测，先从病料中提取DNA，再进行PCR扩增，最后进行核酸电泳，观察结果。

对猪瘟病毒、猪蓝耳病毒、猪变异蓝耳病毒等RNA采用RT-PCR方法检测，先从病料中提取RNA，再以总RNA为模板，反转录扩增cDNA，然后以cDNA为模板，进行PCR扩增，最后进行核酸电泳，观察结果。具体方法参见分子克隆实验指［2］。

2 结果

2.1 细菌分离结果

血平板上没有细菌生长，细菌分离均为阴性。

2.3 病原基因检测结果

猪瘟抗体24头合格、蓝耳抗体29头阳性、伪狂犬gB抗体全合格、伪狂犬gE抗体24头阳性，阳性率分别为77.42%、93.54%、100%、77.42%（具体见表 1、图 1）。

 

表1 免疫血清抗体检测结果

  

猪瘟抗体伪狂犬野毒抗体项目蓝耳抗体 伪狂犬总抗体母猪 公猪 哺乳仔 保育仔 母猪 公猪 哺乳仔 保育仔 全群 母猪 公猪 哺乳仔 保育仔阳性 15 5 3 1 18 5 3 3 31 13 5 3 3可疑 2 1 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0阴性 2 0 0 1 1 1 0 0 0 6 1 0 0总计 19 6 3 3 19 6 3 3 31 19 6 3 3阳性率(%) 78.95 83.33 100 33.33 94.74 83.33 100 100 100 68.42 83.33 100 100全群阳性率(%) 77.42（24/31） 93.54（29/31） 100 77.42（24/31）

  

图1 不同猪群重要疫病免疫抗体阳性率

2.2 免疫血清抗体检测结果

3.3 根据检测结果，初步判断本次疫情应是蓝耳病毒感染导致猪群免疫力下降（也表现在保育仔猪猪瘟抗体水平明显下降），猪群伪狂犬野毒感染压力大，免疫力下降也导致伪狂犬零星发生，圆环病毒普通感染。综合因素作用下，疫情出现。但疫苗的效果还是有的，所以没有出现大的疫情暴发，但猪群一到保育阶段就不稳定，生长速度减慢、消瘦、腹泻等症状出现，死亡数量增加。

电泳见图2，结果显示送检3头仔猪蓝耳病毒和圆环病毒检测全阳性（+），变异蓝耳病毒、猪瘟病毒全阴性 （-），2头仔猪伪狂犬病毒阴性、1头阳性（+）。

2017年，某零售企业的零售网点包括小区周边连锁便利超市已经超过3212家，陕西、山西、甘肃、青海、宁夏、河北、河南等7个省份都有其业务，年销售总额突破40亿元。经营规模持续扩大，原本企业有一个自营的小配送中心，它的功能几乎和传统仓库一样，自营配送中心占地面积小，设施设备落后，缺乏信息技术管理，工作人员信息素养相对较低。消费市场需求愈加旺盛，就得增加门店销售商品品种和数量，现有配送中心无论从软件还是硬件上就无法满足企业经营规模扩大的需要。落后的配送中心经营已经不适应现在经营的需求，服务跟不上时代的需要。

  

图2 样品PCR结果

3 小结与讨论

1.2.1 细菌分离：无菌钩取病料，划线接种于鲜血培养基，置37℃恒温生化培养箱中培养24h，观察结果。

度量的本质在于表示事物某些指标的顺序．这里特别想强调的是，人之所以能够进行度量，并且能够对度量单位得到广泛共识，是基于人的两个先天本能，这就是对数量多少的感知和对距离远近的感知①，这两个先天本能是人能够理解和研究数学的思维基础，这两个先天本能应当作为数学教育的出发点，也应当成为数学认识论和数学哲学的前提．非常遗憾的是，似乎还没有文献从认识论的角度讨论过这个问题，即便可以认为这个问题是认识论的根基．过去的哲学过分关注形而上，或者说过分关注那些观念上的东西，而不关注“人为什么可以”这样的更为现实的问题．

MS，之前又被称作MSP（maritime services portfolio，海事服务集），自2018年10月末在伦敦IMO总部召开的HGDM 2次会讨论之后，更名为MS，其定义为“具有协调统一格式的海上相关信息及数据的供应和交换（HGDM 2/10 4.1.1）”。最新定义大大拓展了MS可能涉及的领域，一切与海上信息相关的服务，都有可能成为一种MS。而目前，MS已确定的服务有16种。如表1所示。

3.2 分猪群来看，猪瘟病毒抗体水平种猪较高，母源抗体水平高，因而哺乳仔猪抗体水平也比较高，但到保育猪出现一个明显的下降，这与猪群在保育发病情况是一致的。估计可能是疫情出现导致免疫力下降，仔猪在第一次免疫猪瘟疫苗后，抗体产生受到抑制。蓝耳病毒和伪狂犬野毒抗体全群抗体水平均很高，尤其蓝耳病毒抗体水平特别高，而且变异系数比较大，说明抗体水平参差不齐。还有2头（1头公猪和1头母猪）蓝耳病毒抗体S/P值已经超过2.5，根据试剂盒的应用经验提示猪群有蓝耳野毒感染。这与3头发病仔猪均查出经典蓝耳病毒是一致的。

据相关统计数据，截至2014年底，中国的电动车保有量超过2亿辆 [1]，但是其防盗系统的设计却十分简单。目前，市场现有的电动车防盗装置，仅能实现声音报警功能，不能够实现对电动车实时位置信息的获取，无法有效减少电动车失窃案件的发生。因此，对电动车防盗装置的更新升级，成为电动车厂商关注的热点，且用户也迫切期待一种安全可靠、实用经济的新型防盗装置问世。

与传统无线mesh网络相比，基于IEEE 802.11n的长距离无线mesh网络有着显著不同[2,3]：(1)单跳链路长度在几十到上百公里，故而链路的传播延迟较长(可达毫秒级)，因此数据包重传及碰撞后退避时需要等待的时间更长.(2)带宽延迟乘积大.802.11n的最大物理层速率高达600Mbps，而长距离链路的传播延迟长，因此带宽延迟乘积大.802.11的MAC (Media Access Control)层采用停等的可靠传输机制，在大带宽延迟乘积的链路上会造成链路利用率低下.长距离无线链路的上述两个特点使得链路吞吐率降低，性能较差[3].

由于社会对个性化医疗的需求，可穿戴传感器的开发成为最近非常活跃的研究领域。电化学传感器因其易于小型化、能耗低等优点，已成为发展可穿戴传感平台最具吸引力的选择。汗液是最受欢迎的可穿戴传感器的样品基质，因为它的组成与各种生理过程有关，因此适合于健康状况和运动表现的诊断[41]。另外汗液分析还是一种无创监测。

参考文献：

［1］胡桂学主编，兽医微生物学实验教程 （第二版）［M］，北京：中国农业大学出版社出版，2016.

［2］ J.萨姆布鲁克（Sambrook.J.），D.W.拉塞尔著；黄培堂等译，分子克隆实验指南（第三版）［M］，北京：科学出版社，2008.

［3］何海健，张传亮，陆国林，等.不同年龄猪群中猪瘟抗体监测及免疫效果分析［J］.中国预防兽医学报，2012（7）：573～575.

减压塔化学清洗以往清洗的基础上有了较大的改善，减压塔侧线建立循环，确保循环量不小于200 t/h，减压塔塔底增加专线至清洗槽，经过清洗槽的沉降和过滤后至加药槽，再通过专泵打入减压塔一线冷回流过滤器处返塔，形成减压塔清洗大循环，流量控制不小于100 t/h，现场实物见图2。通过增设沉降槽，一方面可以观察清洗液变化情况，从而判断减压塔清洗效果，另外一方面可以沉降塔底带来的杂物和油泥，通过沉降和过滤，有效防止杂物和油泥再次带入塔内。从实际操作和清洗效果来看，效果较好。

［4］刘永波，宋春莲，谢相悦，等.云南4个规模化猪场猪瘟抗体水平监测及免疫效果分析［J］.中兽医学杂志，2017（1）：84～86.

［5］郑春芳，雷元顺，于桂阳，等.湖南永州某县猪瘟抗体水平效价低的原因分析及改进措施［J］.中国动物检疫，2013（1）：50～52.

孩子不知道，最大的美是自由，自由才会让生灵展现出多姿多彩的美丽。一旦失去了自由，那美也就没有了灵动之气——比如蝴蝶，比如人。