3个平菇品种摇瓶培养对比

平菇（Pleurtus ostrestus），别称侧耳，属担子菌亚门、伞菌目、口蘑科、侧耳属，是我国栽培最广泛的食用菌之一，营养丰富，肉质细嫩，味道鲜美，具有较高的营养价值，是我国食用菌的主导品种。我国对平菇的栽培始于20世纪的70年代［1］，随着食用菌生产机械化程度的提高，食用菌行业也逐渐步入了产业化、专业化、工厂化大规模生产的模式。液体菌种具有培养时间短、接种方便等优点，是食用菌制种产业的发展趋势。目前关于开展平菇菌种液体培养的技术报道有很多［2］，但尚未出现可完全替代固体菌种进行平菇栽培的成熟技术。鉴此，我们利用摇瓶培养的方式，根据菌丝生物量、溶液pH和培养液中还原糖质量分数筛选3个平菇品种（平菇615、平2002-4、平8633）液体培养的可行性，以期为平菇液体菌种工厂化生产过程控制提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试菌种 平菇615、平2002-4、平8633，由辽宁省微生物科学研究院提供。

1.1.2 培养基 斜面培养基为PDA培养基；摇瓶培养基配方为：马铃薯20%、葡萄糖2%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、维生素B110mg、水1000mL。

1.2 斜面菌种的活化

将菌种接于PDA斜面培养基上，于25℃恒温培养，长满斜面时作为摇瓶培养的一级菌种。

1.3 摇瓶菌种的制作与培养

用250 mL三角瓶，培养基装量50 mL，于121℃、0.12 kPa压力下灭菌30 min、冷却后每瓶接入1 cm2大小的斜面菌种，置黑暗处培养24 h。菌块萌发后上摇床培养8 d，转速178 r/min，培养温度25℃，每天取1瓶检测各项指标［3］。

单因素分析是危险因素，而在多因素分析中没有被认为是危险因素——年龄、肝功能与合并基础疾病等，可能都是由于改变了体内蛋白水平而影响异烟肼的血药浓度的。年龄大的患者伴有低蛋白血症的概率大；肝功能异常必定会导致肝脏合成蛋白的功能受损；合并基础疾病时的用药种类增加，对于蛋白结合的竞争会增加。白蛋白数量下降直接导致结合性药物的数量下降，游离型的增多。药物清除仅针对游离型，因此，药物清除率增加了。虽然异烟肼的蛋白结合率不高，由它导致药物相互作用的临床意义不大，但对于血药浓度影响还是不可忽视的。亚组分析也显示，不同蛋白水平组患者的异烟肼浓度，是有显著性差异的。

1.4 指标测定

试验过程中观察发现，平615菌球生长较快，在第2天即可多点萌生。但菌丝生物量最低；平2002-4菌球大小不一，且培养至第5天时，培养液稍显浑浊；平8633菌球较均匀，生物量最高。从图1可以看出，培养前2 d，菌丝生长缓慢，第3～6天快速增长，随着培养液中营养的消耗，菌丝生长速度开始下降。

1.4.2 pH 用pH计测量。

表面淬火冷却时间：一般要求只保证表面淬火层能充分完成马氏体转变，获得足够的硬度即可。但有时为避免产生淬火裂纹，必须严格控制冷却时间，使零件不冷透，而利用零件内部残存的热量进行零件的自回火。

在如此短的时间内，刚刚经过机构改革的税务部门是否能够迅速适应新的征管要求，配套政策能否按时出台，对于财税部门和立法机关而言，无疑是一场考验。

1.4.3 还原糖 采用3，5-二硝基水杨酸法［4］测定。

2 结果与分析

1.4.1 菌丝生物量 将三角瓶置于白色背景下观察菌球大小、数量、均匀度，然后将溶液置离心机上离心10 min，转速3 000 r/min。置恒重过的定性滤纸上过滤，再置60℃烘箱烘干至恒重，计算干重。

整个过程中，溶液的pH一直呈增大趋势，可能是由于菌丝分解培养液产生部分碱性物质和后期菌球自溶产生碱性物质有关，使培养液的pH略微升高（图2）。还原糖质量分数于试验前3 d快速增加，第5、6天又几乎回落到初始水平（图3）。说明第6天以后，培养液中的营养利用已接近尾声，继续培养，会增加菌丝的自溶。

图1 菌丝生物量变化

图2 溶液pH变化

图3 溶液还原糖质量分数变化

3 小结与讨论

试验表明，就供试的3个平菇品种来说，同等条件下，平8633适应性较强，更适合液体方式制作菌种。若计划大规模液体菌种栽培，还需要做后期的栽培出菇对比试验，进一步验证菌种的适应性。

9月早些时候，Cyclone-30产生的30 MeV射束已进入Faraday杯——这是一个用于在真空环境中捕集带电粒子的金属杯。射束随后被用于生产氟-18。氟-18可用于制备氟代脱氧葡萄糖(FDG)——一种放射性药物。

平菇液体发酵培养，可以通过条件的摸索，找到不同品种的最适液体培养条件。平菇固体制种从母种到原种，再到栽培种，至少需要60 d左右。而液态深层发酵培养平菇菌种，则可快速生产菌丝体，缩短生产时间和成本。液态发酵食用菌菌种，不仅可以快速生产优质食用菌，还可以进一步利用液态发酵的食用菌蛋白质，改善食用菌生产对木屑等原料的粗犷利用和对大自然的破坏。从投资收入与产出的角度来看，建议使用液体深层发酵的方法生产平菇，这样既可节省成本和时间，又可以获得较高的投资收益。

参考文献：

［1］张金霞，陈 强，黄晨阳，等.食用菌产业发展历史、现状与趋势［J］. 菌物学报，2015，34（4）：525-540.

［2］王 芳，张玉萍，孟丽君.平菇液体菌种培养条件的研究［J］. 食用菌，2008（6）：21-22.

［3］贺晓龙，任桂梅，王雪峰，等.平菇液体培养检测指标变化的研究［J］. 江苏农业科学，2013，41（3）：208-209.

［4］王兰青，高玉千，戚元成，等.平菇液体菌种摇瓶和发酵罐生长动力学模型的比较［J］.食品与生物技术学报，2010，29（6）：927-930.