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一、 什么叫综述 综述，是文献综述的简称。医学综述是围绕医药学某一主题，以近期公开发表的科学论文为素材而撰写的条理清晰、内容丰富、准确快捷、有综有述的专题报告。 由于医学综述是以综合医学文献资料为特征的专题报告，所以属于三次文献。 主题——疾病（西医病名居多）、证型、治则、治法、中草药、方剂、针灸、推拿、历史事件、理论与学说。所选定的主题应是进展较大、普遍关注，或有研究基础的。 近期——少则三年，中则五年，多则十年。应视文献多寡而定。从撰写的当前年度向前推。也可用最近发表的一篇综述的最后采用论文的时间作为你写的综述的开始日期，以保持学术发展的沿续性。综述性书籍可根据情况来定，如建国以来某方面研究，中西医结合以来，三中全会以来。如《中西医结合内分泌疾病诊断与治疗》 公开发表——国家出版署批准发行的连续期刊杂志，不含会议论文集、非国家批准、非连续出版的期刊。如《天津中医药》《天津中医学院学报》等。尚未发表也不可进入你的综述。目的是让读者看了你的综述后能够按图索骥找到原文阅读，深入研究。 科学论文——以论文形式在公开发行期刊杂志上首次发表的科学论文，不含经综述或综述性出版物引用的科学论文。如《中国中医药年鉴》引用过的论文。经综述或综述性 条理清晰——综述要分列小标题，不可一气呵成，一逗到底。如对癫痫证治进行综述，小标题可分为辨证分型研究、治则研究、古方成方研究、单方验方研究、针灸研究、护理研究等项。使读者阅读提供便利。 内容丰富——查阅足量的科学论文，地方性一二级期刊要求综述涉及20至30篇。国家级期刊要求50篇。有的大综述引用成百上千篇文献，一期杂志只能发表一篇，连载多期，甚至一个年度。内容广博精深，有很大参考价值。 准确快捷——准确是讲来源准、内容准、数据准，快捷是讲综述的时限性很强，必须以快取胜。如旧《年鉴》意义不大。审综述稿件时先看后面参考文献所涉及的日期。综述写完后不宜锁起来，应立即发表。 有综有述——有综即有综合论文资料的内容；有述包括两个方面：一是对该主题当前研究状况的评价与分析，指出创新点，找出欠缺点；二是对该主题研究的未来提出建设性意见或未来前景的展望。综易述难。 专题报告——综述以文字为载体专题报告。虽然综述属于广义论文，但不能视综述为真正意义上的论文（即阐述和论证个人学术观点为主）。它不提供撰写者的论点论据、研究方法、研究结果。往届毕业生有误将综述当成毕业论文上交，结果影响成绩。 综述有短篇的也有成本的。文献综述文字宜精炼，用词要力求准确。篇幅一般在5000至10000字之内，题目较小，有3000至4000左右也可以。短篇综述散见于各种期刊杂志，又称“小综述”“小专论”。 成本综述多以年度为单位定期出版，虽然每年出一本，但不是只综述一年的发展，一般综述近三五年的文献。如《中国中医药年鉴》《内科学年度评论》《生物化学年度评论》《生理学年度评论》。也有不定期出版物。如《生理科学进展》《心血管疾病进展》《心血管药理学进展》《免疫学进展》《激素研究的新进展》《心脏病学进展》《内科学研究进展》等。要查《全国图书出版目录》才能判断有无新书，不能以图书馆是否购置为依据。 有的期刊出版专辑，刊头有专文评述，介绍有关进展与专辑内容并提出展望。近些年《中华医学杂志》在每年度的最后一期，约请有关专家写出我国各个学科的一年进展。如心血管疾病、消化系统疾病、呼吸系统疾病等。 北京出版社组织编写的《黄帝内经研究大成》《黄帝内经太素研究大成》《伤寒杂病论研究大成》等都具有综述的性质。 二、为什么要撰写综述 总结研究状况，掌握最新动态。 医学研究日新月异，不断有新思想、新观点、新技术、新手段、新方法问世。通过撰写综述可以亲自把握时代发展的脉搏，并运用到临床诊疗工作中去，既可创造社会效益也会带来经济收益。许多院士、教授、学者做学术报告，大家听着很新颖、很生动、很解渴，一语道破天机——他们熟练地掌握了撰写和指导撰写综述的本领。介绍最新成果，提供读者借鉴。引导读者查阅原始资料，进行深入分析与学习。 2．分析研究得失，做为选题依据。 由于研究思路、条件、手段、水平的影响，临床资料良莠不齐。有些研究国家资助或支持的，由大牌专家领衔，拥有大笔资金投入，一流实验设备，优良的研究队伍所承担的课题，其思路、方法、结果、质量在科学性、实用性、可重复性待方面都是高水平的。而一两个人单打独斗的研究，虽然也有闪光之处，但毕竟不能与之同日而语，等量剂观。所以收集到的材料既有得也有失，低水平重复肯定难免。撰写综述可以使作者和读者一目了然，既掌最新最先进的进展，可作为研究的起点（巨人的肩上）；又可找到研究的空白点或欠缺点以及今后研究的发展方向（即展望部分），可作为研究的主攻方向。因此，每一项科研究选题，都必须附有一份相关的文献综述。使评审者对立项的科学性、新颖性、先进性、创新性、可操作性做出判断。评审者虽说都是专家，但对他从来没有深入研究的，或以前研究过但随着时代发展，方法已落后，手段已过时，结果已不足以说明更为深刻问题的时候，他不可能比亲手参予课题的人更清楚。然而他们之所以能做出正确的判断，就是看了你的综述。综述一般是与开题报告捆绑在一起的。综述是为选题、立题服务的。综述的目的不仅是发表，而是开展研究工作的前奏与准备。 教学科研医疗，都离不开综述 教师备课和教学不能满足于背诵和宣讲教科书。高等院校的教师必须及时掌握国内外学科的重大进展，用以不断更新和充实教学内容。虽然教学基本内容来自教材，但教材内容相对滞后，只有教师对所讲内容理解深，对新进展了解多，才能教是活。教师不但应该知道教材上的结论，还应该了解一些重要结论的来龙去脉，要区别是属于推论性的还是证据确凿的，是公认的还是有争论的，这样才能避免教学上的片面性，启发学生思维，培养学生求知欲望和钻研精神。为此，教师备课不但要精读熟暗教材，广泛阅读综述，还应该自己撰写综述。这是提高教师综合素质的需要。 科研工作有较强的继承性，古代是如此，现代更为突出。任何发明创造都离不开前人或别人的研究基础。后面的工作无不受到前面工作的启发并以之为基础。因此，从科研选题、确定方法、进行科研设计到总结，都应该不断阅读收集有关的文献资料，并作出综述。有时在科研进程中（如两年之间），别人报导了新方法及新结果，那么就应该及时修订或调整你的原有科研设计。否则结题时就不能达到“国内领先”的水平。课题组应指定专人即时追踪最新文献。通过撰写综述可以了解有关课题研究的历史和现状，存在的问题以及解决这些问题的途径，分析薄弱环节加以突破。在撰写综述过程中通过深思熟虑，提出新的工作假设，作为研究的新起点。 撰写综述是一种综合性训练，是对医学科技人员的培养与提高的重要方法之一。它能从五个方面提高医学科技人员的能力。 中外文阅读能力和专业知识水平； 写读书笔记和文摘卡片的技能； 分析、评价论文水平的能力和综合问题的能力； 写作和文字表达能力； 培养刻苦钻研，热爱本专业的敬业精神和独立工作的能力。 对于在学的本科生、研究生以及青年教师的培养提高，撰写综述是十分重要的一环。指导老师应该大力对他们进行指导。对科研选题和学风甚至一生的事业都有深远的影响。 三、撰写综述的要求 必须摘录一手资料 第一手资料可根据《全国报刊索引》、《中国医学文摘》、计算机查寻系统而获得，但是由于出版周期的限制，最新的资料仍难获得。只好亲手翻阅期刊的目录和内容。这种方法虽然原始，但是准确度比较高，收集的资料较多。由为主题词往往不能概括论文内容。如“《伤寒论》方药应用心得”一文，在你综述桂枝汤时，主题词会将其漏落掉。因此，从经验角度看，手检是既经济、又准确，还相对省时的方法。说他经济，只要有笔和纸（或卡片）即可。说他准确，主题词所不能含概的也能查到。说他省时，在查阅者认真负责的前题下，手检的反工率较低。 禁止据综述写综述 旁人写的与你重复的综述，对于你的作用，除了掌据动态，认清研究方向之外，只能做为自己撰写综述的起点。如有一篇“原血压证治研究进展”刊登在1998年的某种杂志上，你也似定同梓的题目，可以。但是那篇综述所提及的内容就不要再采用了。应该循着他之后的时间来收集新资料。有人把前一篇中的内容拿过来一部分，再加上几篇新资料，作为自己的综述，被称作据综述写综述。是不允许的。若作为综述性著作可以把不同时期发表的所有综述综合起来。如《中西医结合内分泌论断与治疗》。 不得挟带作者私货 作者本人往往在临床研究中积累了许多经验，当读到他人文献时，觉得自己也是这样做的，而且效果甚至还好。于是就在综述中写入了自己未经公开出版物发表的内容。由于没有出处，被视作私货。如果自己以前发表的论文，可以做为文献引用，并与其他文献一视同仁，公平、公正地对待。综述作者应站在第三人的角度，以第三人的口吻来撰写。《伤寒杂病论研究大成》之所以长期不能完成，就是老一辈总是力图把他们个人观点加到书中来，但这与综述原则不相吻合，出版社不能接受。 不挟带私货，并不意味没有创造性。综述作者发挥创造性可从三个方面着手。 ①把不同作者的资料和观点加以融会贯通，看出其间的内在联系加以阐明。 ②把不同资料列成简表或绘成示意图，使读者一目了然。 ③综述的结尾部分是作者对发展现状的简短评论与对今后和发展的展望。 4．有综有述方为完整 一篇好的综述应当包括综和述两个部分。综是将收集到的尽可能全面详实的资料加以归纳综合，使之有条理化、有层次。述则包括两个内容，一是对所见论文进行提炼，归纳出若干规律或特点。二是对今后本项目研究提出前瞻性分析与展望。从近年来卫生系统收到来自基层医疗机构的综述看，大多数是有综无述。这极大降低了综述的含金量。只标明张氏说、李氏说，而对诸说毫无分析与评价，找不出规律，不能指出研究前沿和不足，对读者的帮助则大打折扣。在所见糖尿病的30多篇综述中只有3篇有综有述。有综无述的综述有漫延的趋势。 作者在选择资料和介绍存在问题时反映了作者观点，但在一般综述中评论不占主要地位。如果以评论为主，则为述评或专论为题。述评和专论一般由学术权威人士撰写，常能指出发展方向。但也有些述评的评论不多，仍不失为综述的范畴。《中华医史杂志》发表了拙作“《黄帝内经太素》成书年代研究述评”，结果许多人误认为本人是权威人士了。 5．参考文献不得省略 综述只是对多篇第一手资料摘要的汇总，简要介绍方法、结果及数据（如例数、有效率、统计学结果等）。不可能容纳更多的具体内容。通过参考文献可起到引导作用。即读者见到一篇最新的综述。可在短时间内大致了解研究概况。如果读者对其中的某一内容或某一点报有极大的兴趣，便可根据综述后的参考文献，去翻阅相关资料，以达到全面了解其具体内容的目的。有些期刊的编辑为节省版面，多登文章，径然删去参考文献一项。结果使综述丧失了引导读者阅读的这一重要作用。 准确适当引用并列出参考文献，是文献综述的重要组成部分。引用文献时要注意以下两点。 一是不可引用自己未读过的文献，从别的文献转引有时会发生错误，以讹传讹。如果未直接读到原文，而读过工具期刊上的文摘，则引工具期刊。如果读过中文翻译就引译文刊物。如《国外医学》中医中药分册收载的译文，在查不到原文的情况下，应注明二次文献的出处。 二是精读文献，选择创造性大、科学性强的文献，除非写医史资料，一般以新文献为主。 6．撰写格式准确规范 首先是大标题，简明扼要，主题突出。由于综述大都以介绍新理论、新技术、新发展等进展为主要内容，所以标题常近况、进展、新进展、评论、研究、研究述评、研究进展等。标题后有的还注有“（综述）”二字。一般不设副标题。 其次是作者所在单位全称（不可写“天津中医一附院”“天津医大总医院”“天津医大三院”之类）。单位所在地的邮政编码（以免失于作者与编辑部及作者与读者的联系）。完整的邮编应是“（天津300193）”。作者姓名。由于工作量不大，无需合作攻关，同时也避免思路、风格、习惯差异带来不连贯，所以综述应是个人撰写。目前期刊有些特约的综述撰稿人。他们水平较高，往往是青年学科带头人或某领域的专家学者。 正文首先是无标题前言，说明综述主题的简要意义，标明综述年代范围（如从1998年至2001年），注明选用期的范围（如国内中文期刊，国内外医学期刊（不含《国外医学》和《中国医学文献》编译的外文资料）。 正文实质部分一是综，二是述。“综”来源于第一手资料的摘要卡片，“述”来源于作者对“综”的归纳分析升华 最后是参考文献栏。含20至50篇文章，太少说明或研究较少，或资料不全，或时限过短。大多说明或选题过大。或研究集中，或时限过长。 参考文献应依其在正文中引用的先后，必须在正文相应内容的右上角以方括弧编号，如：［1］［2］ 参考文献著录格式与示例 期刊 序号 作者．题名．刊名，出版年，卷（期）：页．如： ［1］张╳╳，王╳╳，赵╳╳，等．津门名医杨浩观临床经验简介［J］．天津中医，2002，19(2)：5． 2．报纸 序号 作者．题名．报名，出版年－月－日（版次）．如： ［1］夏雨．国家致力挖掘高技术产业潜力［N］．科学时报，1999－05－09(3) 四、撰写综述具体步骤与方法 1．选择主题 像进行科研选题一样，综述选题是否恰当，关系很大。选题的原则是需要与可能相结合。 所谓需要原则。是指由于教学、科研、医疗和培养人才的需要不同，选题也有不同。若以教学和医疗为目的，题目可稍大一点，以科研立项为目的，题目要极具针对性。如果希望在期刊上发表，还应考虑期刊对综述的要求。 所谓可能原则，主要是所题目必须有新发展，不是教材上已有的内容。新发展可以是理论上的也可以是应用上的，应结合自己的专长或有基础的课题，为期刊写评论性综述的都是该课题研究有成果的专家，否则难以写出水平较高的评论。 收集资料 综述内容是否丰富新颖，决定于收集和阅读资料的多少。简单地说，有三条途径： ①从文摘、索引等二次文献工具期刊查找，如《中国医学文摘》《全国报刊目录》等； ②系统地查阅有关期刊，如《北京中医药大学学报》载有全国中医学院学报理论探讨与综述目录； ③利用光盘或国际互联网。可打印出摘要甚至全文。 阅读文献应精读与粗读相结合。对重点论文，要精读读懂。特别注意是用什么设计和方法验证其工作假说的。例如，过去认为硝酸甘油治疗心绞痛的作用机制是扩张冠状血管，增加心肌供血。现在强调其扩张全身血管减少心肌负荷和耗氧量作用。因此，国外有人对心绞痛病人用心房起搏方法诱发心绞痛时，经心导管注硝酸甘油入冠状动脉，虽有部分病人冠脉血流量短时增加，但心绞痛并未缓解；而静脉注射，随着血压降低，冠脉血流量减少，心绞痛却得到缓解。如果不精读原著，就难以说清新观点的证据。对另一些并无多大创见只是支持新观点的论文则粗读即可。 写笔记作卡片 无论精读或粗读都要写读书笔记或文摘卡片。写笔记与作卡片不是简单抄写，而要在读懂的基础上培养和发挥分析问题的能力。读原著要重点分析该文的创新性，即该文提出了何种新观点、新证据或新的技术方法。记笔记时要写清实验条件、药物、动物或人的标本等项，以便作综述时引用比较。读别人综述时作笔记常需写下其提纲的层次、引用的主要文献、论点和证据，以及作者对有关问题的现状和展望的看法，作为自己写作的参考（不可照搬照抄）。科研论文的创新一般都写在摘要中，但有时作者分析问题的新观点也可以出现在讨论中，阅读和写笔记时应加注意。写完一篇笔记后最好在活页纸或卡片的右上角用几个关键字标记出值得引用的要点，以节省以后分类、引用时重阅笔记内容的时间。对重要论文可以复印，以便精读，但不可以复印代替自己精读，成为“文献收藏家”。 草拟提纲 把查阅的资料要进行分析综合归纳整理，去粗取精，草拟提纲。要把笔记和复印文献及文摘卡片进行分类，根据内容分出若干大类。加上前言和结尾即成综述的全部提纲。有的文献在几方面都要引用，可以写出几个关键字，依次引用。文献的取舍标准主要看创造性和科学性。引用的文献必须有新内容，但又是比较可靠的。判断科学性的标准是科研设计是否严密（如有无适当对照，分组是否合理，样本是否够大，是否随机抽样等），方法是否可靠，数据资料统计处理是否得当等。如果可能，还应了解该文发表后学术界对其的反应。一般从刊物的水平可大致估计出文献的科学性和创造性。重点收集引用核心期刊或被引用多的影响大的期刊。即使阅读高水平的期刊文献，也要持分析与评论的态度，鉴别其科学性和创造性，文章的优点与存在的问题，不可盲目相信一切，不可引用设计或方法不严谨的论文，除非为了批评。“文责自负”一词对综述作者来说，要对引用文献的严谨性负责，误引有错误的文章，表明综述作者的学术分析与评价能力有问题。文献资料诉取舒是否得当和分析综合分段是否合理，决定提纲以至全文的水平，也反映出作者的学术水平。 撰写成文 把提纲变成文字论述。文献综述并没有固定的格式，但通常由前言、综述主体、结尾和参考文献四个部分构成。 前言主要简单说明本题的理论或实用意义及进展概貌和写作目的，以引起读者阅读的兴趣。主体部分是全文的核心部分，应该在对文献进行过“消化吸收”达到融会贯通之后，用自己的语言加以介绍。引用文献时要忠实地客观地反映出原作者的论点或实验结果，但不可照录拼凑。如果发表自己的见解，在语气上必须不使读者误为别的文献作者的观点。在介绍别人工作时，一般不宜过多评论，以免引出不必要争论。要注意用词语气，并可在词气上表明自己的倾向，但要留有余地，掌握好分寸。如“公认”与“一般认为”“有报告认为”；“实验证明”与“实验表明”“提示”“推测”都有不同含义。 五、综述投稿的技巧 我国有几百种医药杂志和医学院校学报以及40种国外医学各专业分册和几种国外药学分册，都刊登不同数量的文献综述。国外还有专刊登综述的期刊。如《生理学评论》《药理学评论》《外科评论》等。国内中文尚没有。每种期刊每期刊登的综述少一篇，多则三篇。一般掌握在两篇。不可能过多。由于期刊不可能过多刊登综述，加之综述以新和快取胜，因此，尽量考虑投给月刊或双月刊。杂志上都有标识。如《天津中医》封底印有“每逢双月12日出版”字样。 编辑人员对综述撰稿人有信誉度的了解问题。所以新人往往投稿应附以个人简介。包括姓名，出生年月，学历学位，职称职务，从事专业，主要研究方向等。以期编辑人员对你有所了解。编辑人员有编辑协会，经常历会，沟通信息，撰稿人应树立自己的良好形象。
掌握了医学微生物学的基础理论、基本知识和基本技能，可为学习基础医学及临床医学的有关学科打下基础，并有助于控制和消灭传染性疾病。医学微生物学是人类在长期对传染性疾病病原性质的认识和疾病防治过程中总结出来的一门科学。了解医学微生物学的过去、现在与未来，将有助于我们总结规律，寻找正确的研究方向和防治方法，进一步发展医学微生物学。医学微生物学medical microbiology微生物学的 1个分支学科。广义的医学微生物学包括兽医微生物学。它研究对人、畜致病微生物的形态结构、营养代谢、生长繁殖、遗传变异、消毒灭菌、对机体的感染致病和机体的免疫机理以及微生物检查法与特异性防治措施。其目的在于控制和消灭传染病和与微生物有关的其他疾病，保障人类的健康并促进畜牧业的发展。随着科学的进步，在医学微生物学中又逐步形成了医学细菌学、医学病毒学、医学真菌学、医学免疫学等独立学科。大多数微生物对人类和动、植物有益或无害，只有少数可引起人类或动、植物的病害。如在人类有伤寒、痢疾、麻疹、脊髓灰质炎；在畜、禽有猪瘟、鸡新城疫、鸭瘟等。具有致病性的微生物称病原微生物，为医学微生物学研究的主要对象。医学微生物学的发展过程大致可分为下述 3个时期：经验时期 早在公元前1世纪，拉丁学者马尔库斯·瓦罗曾提到微生物可能是疾病的原因。中国北宋（960～1126）末年，刘真人就推测肺病是由痨虫引起的。意大利医师G弗拉卡斯托罗（1483～1553）认为各种流行病是由不同的、能迅速繁殖的微小物体引起。奥地利医师普伦齐茨（1705～1786）认为每种传染病都是由独特的活物体引起的。中国清朝乾隆年间（1736～1795），师道南在《天愚集》的鼠死行篇中写道：“东死鼠，西死鼠，人见死鼠如见虎，鼠死不几日，人死如圻堵。”既生动地描述了鼠疫的猖獗，又正确地指出了鼠疫与鼠的关系。中国东晋医学家葛洪（284～364）在《肘后备急方》中，已经有关于防治狂犬病的记载：“杀所咬犬，取脑传之，后不复发。”中国人很早就认识到天花是一种烈性传染病，并且发现了免疫现象。在明朝的《治痘十全》和清朝的《痘疹定论》中，都记述了宋人王旦之子种痘的故事。明朝隆庆年间（1567～1572）改进人痘接种法，并已广泛应用，后来传到俄国、日本、朝鲜、土耳其和英国。人痘接种的发明是中国人对预防医学的一大贡献，也是近代免疫学的开端。实验时期 荷兰人 Avan列文虎克用自制的显微镜首先看到了微生物。法国化学家和细菌学家L巴斯德为防止酒类变质创用加温处理法。随后，英国外科医师J利斯特（1827～1912）用石炭酸喷洒手术室和煮沸手术器械以防止手术后感染，他为防腐、消毒、无菌操作奠定了基础。德国细菌学家R科赫创用细菌染色法、固体培养基和实验性动物感染等，为发现各种传染病的病原体提供了有利条件，他发现了炭疽杆菌（1877）、结核杆菌（1882）和霍乱弧菌（1883）。以后，各国细菌学家相继发现许多人类和畜、禽的病原性细菌，如白喉杆菌（E克莱布斯，1883；FAJ勒夫勒，1884）、肺炎球菌（C弗兰克尔，1886）、脑膜炎球菌（A魏克塞尔鲍姆，1887）、破伤风杆菌（北里柴三郎，1889）、鼠疫杆菌（北里柴三郎、A-É-J耶尔森，1894）等。1884年科赫发表了确定病原菌的“科赫法则”即：①在同样特殊的疾病中能发现同一种病原菌；②能从特殊疾病中分离出病原菌；③把纯培养物接种至易感动物能引起相同的疾病；④能从实验动物中重新获得病原菌的纯培养。这些原则在确定某一新病原体时，至今仍具有一定的指导意义。1892年，俄国学者Д．И．伊万诺夫斯基（1861～1920）发现患烟草花叶病的烟叶汁经细菌滤器过滤后，仍保留感染性，这是认识病毒的开端。此后相继发现人和动、植物的许多疾病都是由病毒引起的。在中国应用人痘苗以后，牛痘苗的发明是免疫学的一个重要里程碑。1798年，英国医师E琴纳（1749～1823）用牛痘苗接种预防天花，奠定了以人工免疫方法预防传染病的基础。1877年，L巴斯德发明鸡霍乱疫苗，随后，又制备出炭疽菌苗（1881）和狂犬病疫苗（1886）。他对减毒菌苗的研究为实验免疫学打下了基础，也为疫苗的发展开辟了广阔前景。1890年，德国细菌学家EA贝林和日本细菌学家北里柴三郎发现白喉抗毒素。1891年，贝林用动物免疫血清治愈一名患白喉的女孩，这是被动免疫治疗最初的病例。此后，科学家们纷纷从血清中寻找杀菌物质，并导致血清学的发展。19世纪末，人们开始认识抗传染免疫现象的本质，并出现两个不同的学派，一个是以著名动物学家И．И．梅契尼科夫（1845～1916）为首的细胞免疫学派，一个是以德国化学家P埃尔利希（1854～1915）为首的体液免疫学派（见免疫学）。1907年，埃尔利希合成治疗梅毒的砷凡纳明（六○六），1910年与秦佐八郎共同合成新砷凡纳明（九一四），这是化学治疗微生物疾病时期的开端。现代时期 随着近几十年化学、物理学、生物化学、遗传学、细胞生物学、分子生物学的发展以及电子显微镜、免疫荧光、免疫酶、同位素标记、电子计算机、质谱仪、单克隆抗体等新技术的应用，医学微生物学得到迅速地发展。例如：①不断发现和广泛应用各种抗生素；②对细菌细胞和病毒形态的研究已经达到亚显微结构的水平，从而进一步理解它们的活动规律；③进一步阐明了细菌内、外毒素的性质、组成和作用机理；④显著地改进了分离培养技术；⑤大大提高了从病人标本中分离弯曲菌或类杆菌的阳性率；⑥在非洲发现了拉沙热、绿猴病或马尔堡病毒症、埃波拉病等病死率很高的烈性传染病等。1967～1971年，美国植物病毒学家TO迪纳在试图分离马铃薯纺锤形块茎病的病毒时，发现致病因子并不是病毒，而是一种分子量约100000的不具有蛋白质的RNA病原体，他称这种小分子量的致病因子为类病毒。尽管到目前为止，仅在高等植物中发现了多种类病毒，但是人们推测，人和动物的一些疾病，如C-J病（CreutzfeldtJakob disease）、羊痒病等，可能是由类病毒引起的。1957年，澳大利亚生物学家FM伯内特提出著名的“克隆选择学说”，使免疫学跨入生物医学的新领域，成为生物学和医学中极为重要的基础学科之一。1971年，在美国召开第一次世界免疫学会议，与会者一致认为免疫学应从微生物学的一个分支发展成为一门独立的学科（见免疫学）。在预防医学方面，1979年10月26日世界卫生组织宣布全世界已经消灭天花，这是抗传染免疫的一个伟大的胜利。中华人民共和国成立后，已经迅速消灭了天花和人间鼠疫，而白喉、麻疹、脊髓灰质炎、结核、新生儿破伤风等的发病率和病死率也大幅度地下降。防治传染病的生物制品的品种、数量和质量都有很大发展。1956年创制了牛瘟弱毒苗，1959年制作麻疹减毒活疫苗成功。科学工作者汤飞凡等人首先分离培养出沙眼衣原体。全国各地开展中医中药的研究，已经发现多种能用以防治某些传染病的中草药。
那要看你的思路是什么，你的方向是什么！
用文字、图形、符号、声频、视频等技术手段记录人类知识的一种载体，或理解为固化在一定物质载体上的知识。现在通常理解为图书、期刊等各种出版物的总和。文献是记录、积累、传播和继承知识的最有效手段，是人类社会活动中获取情报的最基本、最主要的来源，也是交流传播情报的最基本手段。正因为如此，人们把文献称为情报工作的物质基础。在国内国外，都常常可以看到有人把“文献”与“情报”，“文献学”与“情报学”等同起来，虽然这种等同未必适宜，但却反映了文献在情报活动和科学中的极为重要的地位。 区分文献类型或形式有多种方法，其中最主要的是根据载体把其分为印刷型、缩微型、机读型和声像型。（1）印刷型：是文献的最基本方式，包括铅印、油印、胶印、石印等各种资料。优点查可直接、方便地阅读。（2）缩微型：是以感光材料为载体的文献，又可分为缩微胶卷和缩微平片，优点是体积小、便于保存、转移和传递。但阅读时须用阅读器。（3）计算机阅读型：是一种最新形式的载体。它主要通过编码和程序设计，把文献变成符号和机器语言，输入计算机，存储在磁带或磁盘上，阅读时，再由计算机输出，它能存储大量情报，可按任何形式组织这些情报，并能以极快的速度从中取出所需的情报。近年来出现的电子图书即属于这种类型。（4）声像型：又称直感型或视听型，是以声音和图像形式记录在载体上的文献，如唱片、录音带、录像带、科技电影、幻灯片等。 文献在科学和社会发展中所起的作用表现在：（1）是科学研究和技术研究结果的最终表现形式；（2）是在空间、时间上传播情报的最佳手段；（3）是确认研究人员对某一发现或发明的优先权的基本手段；（4）是衡量研究人员创造性劳动效率的重要指标；（5）是研究人员自我表现和确认自己在科学中的地位的手段，因而是促进研究人员进行研究活动的重要激励因素；（6）是人类知识宝库的组成部分，是人类的共同财富。 根据文献内容、性质和加工情况可将文献区分为：一次文献、二次文献、三次文献。一次文献指以作者本人的研究成果为依据而创作的原始文献，如期刊论文、研究报告、专利说明书、会议论文等。二次文献是对一次文献进行加工整理后产生的一类方面，如书目、题录、简介、文摘等检索工具。三次文献是在一、二次文献的基础上，经过综合分析而编写出来的文献，人们常把这类文献称为“情报研究”的成果，如综述、专题述评、学科年度总结、进展报告、数据手册等。与此类似，也有把情报区分成一次情报、二次情报、三次情报的。 构成文献的三个基本要素是:知识、载体和记录 文献综述有两种，一种是“大综述”，就一个领域的文献的总结，经常会发在专门发Review的杂志上，或者是在Handbook里。写这种综述文章的人有许多是权威人物，但也有一些是助教授级别的人写的，但作者一般都是在这个题目上做了相当贡献的人。“大综述”中还有一种“超大综述”（这些提法都是我为了论述方便杜撰的）以前在Bhagawati时代，Bhagwati、Max Corden等人做过一些整个国际贸易理论领域的综述，但这些年我没有见到有谁做类似的东西，现在一般综述都是就作者擅长的一个方面写的，然后集在手册里。另外一些研究生教材，特别是Feenstra的那本，写法很像综述。 另一种是“小综述”，就是论文第一部分Introduction部分的综述。这个综述的目的主要不是为了向其他人介绍前沿，而是为了推出自己的论述和模型，是以述带论，核心功能是定义“Gap"，就是说明现有的研究状况如何，缺在哪里，我准备做的贡献是什么。所以，这种综述并不强求非常全面细致，不是“掉书袋”，而应该侧重介绍与自己的研究直接相关的文献。 对于”大综述“，我觉得我们在没有一点原创性的研究以前最好不要写。没有见过几棵树，谈不上去见森林。我现在有了一点点研究体会之后感觉，一个题目，你没有扎进去之前，许多体会感受都是虚的。以前国内文献搜集有困难，早期出来的一些前沿介绍当然就很有意义。现在你如果真正做研究，文献检索不应该成为很大的困难。所以做二道贩子，将人家研究的东西半懂不懂地编译一下，在真正做研究的人中间也不会有什么市场。至少我自己，我也建议大家，不去看没有原创贡献的作者写的综述文章。即使是原创文章的前沿综述，也有一些问题。前一段时间一个老师给我一些城市经济学的综述，是这个领域的很活跃的一些作者要出的手册，当时这个老师给我的时候，指着其中一章说：This strand is dying。都是最活跃的作者写的在还没有出版的手册上的文献综述，有的就已经要过时了。所以，赶风头永远是赶不上的。 对于“小综述”，这是人人都可以写，而且应该写的。如果你心中有了题目，就应该围绕这个题目去尽量搜集最新的文献，这个风头是绝对应该赶的。我个人看法是不要强求自己去理解整个国际贸易理论发展的脉络，具体题目深入下去，对整个国贸理论有时候有具体而微的全息功效，你自己有时候也会产生有一些格物致知的感受。但是，真正要去理解什么脉络，恐怕不是一下子的工夫。当然，我这里所说的前沿、深入，都是相对而言的，每个人不同的学习阶段，不同的条件和功底，会有不同的成果和收获，只要尽责做了，就是好的。
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文献综述是在毕业论文（设计）开题前针对某一研究领域或专题搜集大量文献资料的基础上，就国内外在该领域或专题的主要研究成果、最新进展、研究动态、前沿问题等进行综合分析而写成的、能比较全面的反映相关领域或专题历史背景、前人工作、争论焦点、研究现状和发展前景等内容的综述性文章。“综”是要求对文献资料进行综合分析、归纳整理，使材料更精练明确、更有逻辑层次；“述”就是要求对综合整理后的文献进行比较专门的、全面的、深入的、系统的评述。综述另起一页撰写，题目用小二号黑体加粗居中（综述题目尽量不与毕业论文题目雷同）。综述在目录中以“综述”二字表示并标注页码，综述内部小标题不再体现于目录中。综述正文格式参考毕业论文（设计）正文格式。综述一般应包含以下四部分：概述、主题、总结和参考文献。概述部分：主要是说明写作的目的，介绍有关的概念、综述的范围，扼要说明有关主题的现状或争论焦点，使读者对全文要叙述的问题有一个初步的轮廓。正文部分：是综述的主体，其写法多样，没有固定的格式。可按年代顺序综述，也可按不同的问题进行综述，还可按不同的观点进行比较综述，不管用那一种格式综述，都要将所搜集到的文献资料归纳、整理、进行分析比较，阐明有关主题的历史背景、现状和发展方向，以及对这些问题的评述，主题部分应特别注意代表性强、具有科学性和创造性的文献引用和评述。总结部分：与一般论文的小结有些类似，将全文主题进行扼要总结，提出自己的见解并对进一步的发展方向做出预测。参考文献：是进行毕业论文（设计）和研究的基础，撰写文献综述的依据，列出这些参考文献不仅表示对被引用文献作者的尊重及引用文献的依据，而且也为评审者提供查找线索。参考文献的编排应条目清楚，格式规范，查找方便，内容准确无误。参考文献的格式参考上述毕业论文（设计）参考文献格式。综述参考文献要求8篇以上。
酵素就是酶！主要是促进食物的消化、吸收，促进细胞代谢，分解多余脂肪，调节三大营养素的平衡，对身体非常重要。我们人体自身就有很多的酶，由于饮食、生活习惯等原因可引起酶分泌的减少。酵素在蔬菜、水果尤其是果皮果茎及未成熟的果汁中含量较高。我对酵素市场部了解，建议饮食上的调节。酵素就是酶，本质是蛋白质，说它对慢性病有治疗作用，这种说法本身就有问题。其次，酶在胃中消化后被分解为氨基酸片段，吸收到需要的地方去，根本不会按照宣传中的途径去发挥作用。所以，酵素治疗慢性病也是不靠谱的说法。制作方法：按照 蜂蜜比纯净自来水 1：10，或者按照 红糖比纯净自来水1：10 ，加入到大玻璃瓶里，混合成蜂蜜水或红糖水。纯蜂蜜不太容易买到，红糖是不错的选择。如果有酵素原液做为母液加入一点，能起抑制杂菌作用。将水果洗净，把表面水珠甩干，吃水果时削下来或扒下来的果皮做原料，放入大玻璃瓶里做酵素，可以随吃随放。或者用水果作原料，去核切片放入瓶里。果皮里含有酵素多于果肉，苹果、柠檬、梨、橘子、脐橙等水果皮都可以用来做酵素，水果品种多些酵素质量更好。据说用桑葚为原料，做出来的酵素作用更强。做酵素时，最好用一个柠檬洗净甩干切片加入到玻璃瓶里，有抑制杂菌作用。原料里加入橘子皮、脐橙皮，酵素味道芳香好吃。氧气不足会加重酒精发酵。每天打开玻璃瓶盖换气（瓶口加纱罩防蚊蝇生虫），防止出现浓重的酒精味。长时间停留在液面上的果皮可能会霉烂并产生霉味。经常摇一摇大玻璃瓶，或者用勺、筷等工具翻动物料，使浸泡在液体里的果皮（果肉）上下位置交换，防止果皮（果肉）长期停留在液体表面上。原料体积不要超过玻璃瓶容积的百分之八十。为防止发酵液体膨胀溢出，给产生的气体留出足够空间。（从最早投料时间算起）发酵三个月以上，果皮（果肉）下沉到瓶底，酵素基本可以食用了。夏季高温季节发酵速度更快，发酵时间可缩短。糖尿病患者吃的酵素，要求蜂蜜、红糖全部转化成寡糖才能吃，发酵时间要确保半年以上。发酵时间越长，酵素的质量越好；酵素可以长期储存不变质。发酵好的酵素味道酸溜溜的，有一点酒味亦正常。只有经过酸性锤炼的酵素，才能顺利通过胃酸环境，到肠内去发挥作用。发酵时瓶内液表面有白色泡沫或白膜是正常现象，可以食用。将果皮（果肉）用料理机磨成细糊，过滤后将液体装瓶即果皮环保酵素原液。剩下的果皮渣也可食用。我用酵素糊直接冲水稀释饮用。自制酵素早期要注意无菌操作，接触物料的刀、板、勺、筷等工具必须洁净，尤其不能沾到油类；如果发现绿毛、黑毛要及时清除，确保酵素成功。后期不慎偶有少量杂菌混入，能被酵素同化，不至于坏掉酵素
用果皮制作酵素方法如下：准备材料：果皮、红糖、水。1、将果皮切成小块。2、将果皮、红糖、水按3：1：10的比例放入塑料瓶中，材料体积不得超过容器的80%。3、在塑料容器中密封3个月。4、第一个月，每天拧松瓶盖，放出气体后拧紧。5、用果皮制作的酵素就做好了。用途：1、 减少垃圾、废气丢弃的厨余会释放甲烷(methane)废气，比二氧化碳导致地球暖化的程度高21倍。2、 省钱变为环保清洁剂，节省家庭开销。3 、生活好帮手可用作：有机肥料。4 、宠物保养能去除宠物身上的味道，减少寄生虫生长。5 、防水管堵塞可疏通马桶或水槽，防止阻塞及净化粪池。6 、化学实验室材料环保酵素已被广泛应用于化学实验室，用来断裂化学键
陈皮酵素是模拟水果、蔬菜在人体内的消化过程，采用现代分子生物学技术和先进的发酵工艺，将国家地理标志保护产品“新会陈皮柑”果肉进行预消化，把大分子物质转化为容易被人体吸收的小分子物质，混合微生物发酵过程中产生的益生元，形成一种新型的微生态饮品。产品含有多种活性酶（酵素）和免疫多糖，此外还含有人体必需的维生素、微量元素、氨基酸、小肽、寡糖、核苷酸。陈皮酵素陈皮酵素陈皮酵素的功效与作用：新会陈皮果肉在长达580天时间内经过二次发酵，最大限度地保存了酵素的活性，饮用后，可以清理肠道毒素，分解食物营养，消除多余脂肪，加速新陈代谢，平衡体质，减轻亚健康状态。陈皮酵素成分是：配料表：陈皮（橘皮）、柠檬、山楂、菠萝、苦瓜、红枣、桂圆、枸杞子、沙棘等。酵素俗称“酶”，是一种具有催化活性的蛋白质。无论动物还是植物，一切生物的活动都需要酶的参与。陈皮酵素降尿酸、降血脂、降血压和调节胃肠道功能。陈皮酵素是广东新宝堂生物科技有限公司开发的饮料浓缩汁，由总黄酮、粗多糖等组成，文献综述报道总黄酮具有抗氧化、抗衰老、防辐射、消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、活化大脑、降血压及调节其他脏器细胞的功能；粗多糖具有增强免疫力、促进双歧杆菌的增殖、抑制病原菌、防止便秘、腹胀、促进消化、调节肠胃功能、降血糖和防治糖尿病作用、降血脂、抗血凝、抗血栓等作用。
医学综述写法如下：一、确定主题选定的主题在综述的写作中起着重要的作用。最重要的是，内容要求新颖，只有新的内容才有诱惑力。论文选题还应包含近些年获得具体进度、合适我国国情、也是技术专业科研人员关注的课题研究。二、查阅文献题目明确后，必须查阅和累积有关文档和材料。对于初学者来说，他们通常不知道从哪里开始搜索文档。一般来说，权威参考书，如专著、教科书、学术论文等，可以先收集。教科书的描述比较全面，提出的观点被大多数人普遍认可。三、加工处理必须处理读取的数据，这是编写摘要的必要准备过程。根据摘要的主题要求，对书写的摘要卡片或笔记进行整理、分类和排列，使其具有连续性和组织性，力求论据清晰、依据明确、论述层次清晰、逻辑性强。四、撰写成文在写一篇文章之前，你应该先草拟一个大纲，决定先写什么，然后写什么，应该强调什么，在哪里纳入你自己的观点，在哪里省略或做一些简短的评论。重点应该分成几个小标题。当你写提纲的时候，你可以从更多的细节开始，然后在浏览的时候修改它。
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使人或动物产生疾病的真菌、细菌等微生物叫病原微生物。例如引起肺炎的肺炎球菌、引起腮腺炎的腮腺炎病毒。病原微生物种类是人们根据生物学特征、致病机理等对这些病原微生物的种属划分。
具有致病性，能引起人类和动、植物的病害的微生物称为病原微生物。它们能引起人类的伤寒、痢疾、结核、破伤风、麻疹、脊髓灰质炎、肝炎、艾滋病等疾病；还会引起动物的禽流感等疾病。
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摘要：病原微生物种类繁多，变异迅速，快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着。目前，应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因芯片、多聚酶链反应等，该文对这些检测技术进展做一综述。 对人和动物具有致病性的微生物称为病原微生物，又称病原体，有病毒、细菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、真菌、放线菌、朊粒等。这些病原微生物可引起感染、过敏、肿瘤、痴呆等疾病，也是危害食品安全的主要因素之一。近年来出现的SARS、高致病性禽流感、西尼罗病毒感染等疾病的传染性极强，往往造成世界性大流行，因此对病原体的检测必须做到快速、准确。常规病原学检测方法操作繁琐，检测周期长，而且对操作人员技术水平要求比较高。随着医学微生物学研究技术的不断发展，病原学诊断已不再局限于病原体水平，深入到分子水平、基因水平的检测手段不断出现并被应用于临床和实验室 J。核酸分子杂交技术、PCR技术、基因芯片技术等检测方法，自动化程度高，快速省时、无污染、结果精确，可以准确灵敏地鉴定病原微生物。1 传统的病原微生物的检测方法传统的病原微生物学实验室检查以染色、培养、生化鉴定等为主，将标本直接涂片染色镜检和接种在培养基上进行分离培养是对细菌或真菌感染性疾病进行病原学诊断的常用方法。1．1 直接涂片镜检病原微生物体形体积微小，大多无色半透明状，将其染色后可借助显微镜观察其大小、形态、排列等。直接涂片染色镜检简便快速，对那些具有特殊形态的病原微生物感染仍然适用，例如淋球菌感染、结核分枝杆菌、螺旋体感染等的早期初步诊断。直接涂片镜检不需要特殊的仪器和设备，在基层实验室里仍然是十分重要的病原微生物检测手段。1．2 分离培养与生化反应 分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。细菌的生长繁殖需要一定时间，检测周期较长，不能同时处理批量样本。为解决这一问题，各种自动化培养和鉴定系统不断产生，传统鉴定方法也在逐步改进，大大加快了检验速度。例如Microscan WalLCAway全自动微生物分析仪，可同时做细菌鉴定和药敏试验，检验500多个菌种。苛养菌如肺炎链球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌等对营养要求比较高，常规培养阳性率低。雍刚 等将不要同比例的葡萄糖、玉米淀粉、生长因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌剂加入到巧克力培养基中制成了新型淋病奈瑟菌培养基，大大提高了淋病奈瑟菌的分离培养率。苏盛通等在营养琼脂中加人了中药红枣、赤小豆培养甲型链球菌、乙型链球菌、肺炎链球菌等细菌，生长指数明显高于血平板。1．3 组织细胞培养 活组织细胞培养适于专营活组织细胞内生存的病原体，包括病毒、立克次体、衣原体等。不同病原体敏感的组织细胞是不一样的，将活细胞从病原体敏感的动物组织中取出在体外进行原代培养或用病原体敏感细胞系进行传代培养，再将病原体接种于相应的组织细胞中后，病原体可在其中繁殖增长，引起特异性的细胞病变效应。也可以将病原体直接接种于敏感动物体内，引起相应组织器官出现特异的病理学改变。往往可以根据这些特异的病变对病原体进行鉴定。2 血清学与免疫学检测血清学检测是通过已知的抗体或抗原来检测病原体的抗原或抗体从而对病原体进行快速鉴定的技术，简化了鉴定步骤，常用的方法包括血清凝集技术、乳胶凝集实验、荧光抗体检测技术、协同凝集试验、酶联免疫测试技术等。酶联免疫技术的应用大大提高了血清学检测的敏感性和特异性，不仅可检测样本中病原体抗原，也可检测机体的抗体成分。幽门螺奸菌在我国人群感染率高达50％ ～80％ ，应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测唾液中抗HP抗体来诊断HP感染，其结果满意。乙型肝炎病毒(HBV)在我国人群中感染率极高，ELISA应用于乙型肝炎病人早期血清学诊断的效果最为明显。临床上致病菌往往和非致病菌混合在一起，如何从这些细菌中分离出目标菌是关键。免疫磁珠分离技术(IMBS)是近年来发展起来的在微生物检测领域中一种新技术。其基本原理是将特定病原体的单抗或多抗或二抗偶联到磁珠微球上，通过抗原抗体反应形成磁珠一目标病原体复合物或磁珠一一抗一目标病原体复合物，在外部磁场磁力的作用下，将目标病原体分离出来。目前已经开发出了针对各种病原体的免疫磁珠，如大肠埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、军团菌等，广泛应用到各级科研和实验室 。经IMBS分离出的白色念珠菌可直接在显微镜下检测，检测时间缩短至4 h。IM—Bs还可以和其它检测技术联合来检测病原菌，免疫磁珠分离得到的目标菌可继续用于分离培养使大肠埃希菌0157最低检测限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g～；IMBS结合聚合酶链反应(IMBS—PCR)可对培养条件比较特殊的细菌如苛养菌、厌氧菌进行快速检测，肉类中的产毒素型产气荚膜梭菌经IMBS．PCR检测，检测时间缩短到10 h，最低检测限可达10cfu·g～，有研究者利用IMBS结合实时荧光定量PCR(IMBS—RT—PCR)成功检测出了水中的轮状病毒和草莓的诺如病毒，检测时间大大缩短；Leon—Velarde等利用IMB8结合酶联检测，大大提高了沙门菌的检测效率。3 基因检测随着科技水平发展，分子生物学检测技术日新月异，对病原微生物的鉴定已不再局限于对普通外部形态结构和生理生化特性等的一般检验上，而是深入到了分子水平、核酸水平。病原微生物的核酸序列即基因片段都是特异的，有别于其他种或属，检测其特有的基因片段序列可用来鉴别病原微生物。随着科技的发展，基因检测技术逐渐代替其它检测技术，成为临床检验科和基础实验室对病原体的主流检测技术。3．1 核酸杂交技术具有一定互补序列的核苷酸单链在液相或固相中按碱基互补配对原则缔成异质双链的过程叫核酸杂交，其杂交双方是所使用探针和要检测的核酸。在病原微生物检测中核酸分子杂交主要包括膜上印迹杂交和核酸原位杂交两种。膜上印迹杂交是指将核酸从微生物细胞中分离出来，纯化后在体外结合到一定的固相支持物上，与存在于液相中标记的核酸探针进行杂交。核酸原位杂交是指标记的核酸探针直接与细胞或组织切片中的核酸进行杂交。探针还可以用荧光标记，在荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜下即可鉴别病原体还可显示在三维空间中的位置。核酸分子杂交检测技术与其它方法相比显著地优点是简便、敏感、快速、特异。Wong 等用荧光标记2个不同的寡核苷酸探针从血液标本中检测出假单胞菌属和不动杆菌属的细菌，最低检测限为10 cfu·mL～，特异度为100％ ，检测时间不到2 h。寡核苷酸探针是针对病原体特异基因序列设计的，可以将待检测的病原体定位在不同的分类等级，如科、属、种、亚种“ 。（病原微生物检测技术进展）3．2 基因芯片技术基因芯片(DNA chip)又称为DNA微阵列(DNA microarray)或DNA芯片，是生物芯片的一种 j，是核酸分子杂交技术发展延伸而来的。通过微加工技术，将数以万计甚至百万计的基因探针即DNA片段有规律地排列成二维DNA探针阵列，固定到硅片、玻片等固态支持物上，与标记的样品分子进行核酸杂交，用于基因检测工作。其测序原理与核酸杂交一样，但解决了传统核酸杂交技术操作繁杂、检测效率低、自动化程度不高的缺点。基因芯片在病原微生物感染诊断上的应用，大大缩短了确诊所需要的时间，而且能检测出病原体是否耐药、对那些抗生素耐药、对那些抗生素敏感。Naas 等设计的基因芯片可以检测出铜绿假单胞菌、肠杆菌属、鲍氏菌属中各型B一内酰胺酶类耐药基因。蔡挺等设计的基因芯片检测出大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、阴沟肠杆菌对l7种抗菌药物的耐药率。Batchelor 等开发的基因芯片可以检测出编码耐超广谱8．内酰胺酶、磺胺类、四环素类、氨基糖甙类等47个耐药基因的大肠埃希菌和沙门氏菌。基因芯片技术同样还有些问题有待解决，如提高芯片的特异性和检测信号的敏感性，降低芯片的制作成本等，而且多数芯片都需要昂贵的检测仪器，这些问题使得基因芯片到目前主要局限于实验室研究而未能广泛应用于临床病原微生物的检测与鉴定。（病原微生物检测技术进展）3．3 PCR技术聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一种在体外是用已知寡核苷酸引物引导未知片段中微量待测基因片段并进行扩增的技术。由于PCR可以对待测基因进行扩增，特别适用于病原体感染早期的诊断，但是如果引物特异性不强，可能会造成假阳性的出现。PCR技术在近20年里发展迅速，从基因扩增到基因的克隆和改造以及遗传分析，可靠性逐步提高。Jbara 用PCR和传统法直接检测75例样本中的流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌，与传统方法相比，PCR检测的特异度和灵敏度分别为87．3％ 和100％ 。1988年Chamberian等提出了多重PCR的概念，同一PCR反应体系里加上二对以上引物，可同时扩增出多个核酸片段，适合大量样本的分析与鉴定。多重PCR具有：(1)高效性，在同一反应体系内可同时检出多种病原微生物，或对同一病原微生物的不同型别进行分型；(2)系统性，多重PCR很适宜于成组病原体的检测，如几种肝炎病毒同时感染；淋球菌、梅毒螺旋体、艾滋病病毒等多重性病病原体的感染；需特殊培养的无芽胞厌氧菌感染；破伤风杆菌，炭疽杆菌，产气荚膜杆菌，鼠疫耶尔森菌等战伤感染细菌感染；(3)经济简便性，多种病原体在同一反应管内同时被检出，节省试剂、节约费用、节省时间，为临床提供更快更多更准确的诊断信息。Reyes等 用多重PCR从90例发热但培养阴性的儿童细菌性脑膜炎脑脊液样本中检测出了脑膜炎奈瑟球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌，特异度100％ ，敏感度89％。实时荧光定量PCR，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程。具有高度灵敏、高度特异、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时荧光定量PCR对性病病原体早期确诊、窗口期筛查、疗效检测、基因变异分析和预后评估等具有重要价值，为流行病学调查提供帮助 J。王娉等 建立了多重实时荧光定量PCR反应体系，同一体系能同时快速检测出耐甲氧西林和产肠毒素A的金黄色葡萄球菌。荧光基团标记的特异性引物可准确反映病原体感染和药物疗效，特别适用于不可人工培养和难以培养的病原体如病毒、衣原体等感染的诊断。基因芯片技术与多重PCR结合可以通过PCR对目的基因进行放大，通过基因芯片的荧光探针增加检测的灵敏性和特异性，使得两种检测技术的优势互补，已广泛应用于病原微生物的检测。将病原体特异性基因作为靶基因设计出引物与探针，进行多重PCR扩增，制备出寡核苷酸芯片，再对待测样本靶基因进行多重PCR扩增，将扩增产物与病原菌多重PCR基因芯片检测体系杂交，可根据杂交信号直观地判读样品中所含病原体的种类、型别、毒力、侵袭力，从而对病原体进行检测和鉴定。（病原微生物检测技术进展）3．4 其它基因检测技术分子生物学技术飞速发展，各种新的基因检测手段不断出现。Notomi等于2000年开发出一种新的环介导恒温核酸扩增法(1oop—mediated isothermal amplifi—cation of DNA，简称LAMP)，针对靶基因序列上6或8个特异区域设计出4或6条引物，在具有链置换活性的DNA聚合酶的作用下形成环状结构和链置换对目标DNA大量扩增。短短几年LAMP已被广泛应用于疾病诊断、食品检验、环境监测、生物安全等各方面心 ]。李蒙等 运用LAMP法60 min检测了16例开放性伤口深部伤口感染分泌物中的破伤风芽孢梭菌，其中阳性为4例，最低检测限为4 x 10 。有研究报道l2 用LAMP技术快速检测了200例肺结核患者的痰标本，结核分枝杆菌的阳性检出率远远高于培养法和染色法。多位点可变数目串联重复序列分析(Multiple—locus Variable—nun—ber Tandem repeat Analysis，MLVA)是一种根据病原体基因组中可变数目串联重复序列的特征来对病原体基因分型的一种技术，广泛应用于金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、炭疽芽胞杆菌等的基因分型与鉴定 ⋯。4 小结与展望对病原体进行快速准确的检测和鉴定是传染病防治工作的首要问题。随着生物学研究由宏观领域向微观领域的发展，病原体检测方法也从组织形态学水平深入到分子水平、基因水平。近年来发展起来的病原微生物高通量检测技术样本需要量少、快速省时、无污染、诊断结果精确、自动化程度高，相信随着研究的不断进展和深入，这些高通量诊断技术和方法必将在病原微生物的诊断分析方面起到越来越重要的作用，而多种检测技术的联合和综合更是有着广阔的应用前景。