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我也是刚做完毕业论文，也算是过来人了，对这个还算是比较了解：尤其是在近来全国高校教学评估的大背景下，毕业论文中所有的参考文献都是需要在正文中标注的，要不然你的指导老师肯定会让你一而再再而三的修改的受到启发的文章当然也可列为参考文献，因为你既然受到了启发，你就应该把启发的背景介绍一下，这必然就是参考文献的内容，所以同样应该标注的
你只是毕业论文，要求没有学术论文那么高，学术论文主要是因为考虑到知识产权，侵权之类的问题，所以，必须把每一份参考文献都标明，但是，只要在末尾标注了，就可以在正文中不注释，因为，正文中太多的标注，会给人感觉，你这篇学术论文似乎是大染缸，似乎是别人的成果拼凑而成，所以，很多从命的学者，喜欢统一放在论文末了，一来，没有很多人关心，二来，
一篇2003年博士论文后的参考文献，中文部分的安胜姬,张兰英,郑松志．二异氰酸酯与壳聚糖交联产物对金属离子的吸附性能长春科技大学学报29 (2):197~199包光迪甲壳质及其提炼化学世界10(3):137~138包启明甲壳质纤维制造法化学世界13(9):388~389包启明甲壳质的新的利用-离子交换纤维和离子交换织物化学世界 1959(6):271~272本星义明，栗田工业株式会社架桥されたュソニセクマソナソ球状粒子及びその制法JP昭62- 昭61-04-本星义明,栗田工业株式会社架桥グルコマソナソィォソ交换体JP平1- 昭62-01-06蔡希陶中国产之蒟蒻属植物中国植物学杂志4(1):1~常敏毅抗癌本草长沙,湖南科学技术出版社,306~陈开勋新领域精细化工北京:中国石化出版社313~342陈玲,杨连生,余淑君,颜盛发,张力田制备羧甲基淀粉的研究食品工业科技1997（2）:9~12陈志勇,张玉霞,袁彦超红麻纤维对Zn2+、Cd2+、Cu2+、Ni2+离子的吸附信阳师范学院学报(自然科学版)15(2):186~188陈志勇,栗印环,张艳青硫氨脲基红麻纤维的制备及其对Ni2+、Cr3+、Mn2+的吸附性研究信阳师范学院学报(自然科学版)15(3):333~335陈中兰,陈龙生新型鳌合纤维素富集原子吸收测定痕量的铅、镉、铜和镍离子交换与吸附18(5):464~469陈中兰吡咯烷二硫代甲酸铵螯合纤维素对Cd2+的吸附机理应用化学19(11):1097~1099冲增哲、黑田俊朗、岸田典子著古明选译魔芋科学成都，四川大学出版社157~171崔志敏,朱锦瞻,罗儒显两性甘蔗渣纤维素的合成及应用研究离子交换与吸附18(3):232~240董绮功,张军平新型含氮、硫纤维素螯合树脂的合成及其吸附性能高等学校化学学报24(4):719~723董绮功,张军平,李亚荣聚硫醚型纤维素的合成及其吸附性能应用化学19(l):94~96范田园,魏树礼,周喜林利福平乙基纤维素微球的制备及质量评价北京医科大学学报1999(2):43~44方华丰,周宜开壳聚糖微球的研究进展国外医药-合成药生化药制剂分册20(5):315~318冯长根，白林山，任启生二甲胺修饰戊二醛交联壳聚糖树脂的制备及性能离子交换与吸附19(3)：263~268冯长根，白林山，任启生壳聚糖衍生物吸附剂在蛋白质分离纯化中的应用离子交换与吸附19(3)：282~288冯淑英 包醛氧淀粉与氧化淀粉治疗慢性肾衰疗效比较中国疗养医学 19954(3):74~76冯叙桥,赵静,张盛林魔芋的利用与加工食品与机械 1995(5):12~13冯亚青,刘燕氧化纤维素的制备及吸附性能的研究天津大学学报:自然科学与工程技术版35(6):766~768傅伟昌,王继薇两性化螯合棉纤维的合成与吸附性能研究林产化工通讯36(3):9~11高洁，汤烈贵主编纤维素科学(第一版)北京,科学出版社2 龚盛昭利用蔗渣或稻草制各重金属废水处理剂—纤维素黄原酸酯的试验甘蔗糖业1999(5):43~45．古卓良,凌树森白魔芋精粉对荷瘤小鼠的抑瘤和免疫增强作用营养学报20(3):343~347贵州省中医研究所贵州草药(第二集)贵阳,贵州人民出版社70郭国瑞,钟海山,王科军，滕丽莉微波作用下甲壳素的脱乙酰化和壳聚糖的羧甲基化赣南师范学院学报1997(3):57~59杭州大学化学系分析化学教研室分析化学手册(第二册)北京：化学工业出版社616~何东保,石晓明,石毅,詹东风羧甲基魔芋葡甘聚糖/壳聚糖凝胶化性能研究林产化学与工业22(2):70~74何永炳,孟令芝,陈富偈,胡翎,陈远荫棉杆纤维素的改性Ⅰ棉杆纤维含氮衍生物的制备及其吸附性能应用化学15(3):243~245何永炳,孟令芝,陈富偈,吴成泰,唐玉蓉绵杆纤维的改性(Ⅱ)─氮杂冠醚化纤维素的制备及其对金属离子的吸附性能离子交换与吸附14(3): 236~238胡翎,孟令芝,李庆云,何永炳棉杆纤维素的改性(Ⅲ)—多乙撑多胺纤维素醚的制备及其吸附性能应用化学16(1):44~47化学工业部晨光化工研究院成都分院珠状交联葡甘聚糖的制备方法 ZL1993-04-黄海兰,曲荣君 CMC-Na/TETA-B62型蛇笼树脂对Ag+、Cr3+和Hg2+的吸附性能离子交换与吸附19(1):43~48黄海兰,曲荣君CMC-Na/DETA-B62型蛇笼树脂对金属离子的吸附性能 离子交换与吸附18(3):217~222黄卡玛,刘永清,唐敬贤电磁波对化学反应非致热作用的实验研究高等学校化学学报,17(5):764~黄宁兴,郑文杰,谢红鹰,黄任鹏,欧阳健明 两种磁性微球的载药特性广州化工27(3):34~吉林大学微波干法制备阳离子淀粉CN1050024,1989-09-纪春暖,成国祥蛇笼型螯合树脂CMC/EDA/B-62的合成及性能研究林产化学与工业23(1):35~38贾成禹,陈家任魔芋葡甘露聚糖新载体制备和对葡萄糖淀粉酶的固定化生物化学杂志7(3):359~364贾云改性纤维素的制备及其对铜离子去除的研究[J]重庆师范学院学报(自然科学版)14(1):31~35江苏新医学院中药大辞典(缩影本)上海:上海科学技术出版社329~ 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:马百平魔芋的药用研究概况中草药24(1):49孟令芝,杜传青,符兆林,何永炳,陈远荫多孔纤维素球衍生物的制备与性能武汉大学学报(自然科学版)2000(2):43~46孟令芝,杜传青,龙凯,陈莉,何永炳纤维素-铝-硅复合物的制备及对重金属离子的吸附环境科学与技术2000(2):6~9潘海燕,冀兰涛,丁清波梧桐落叶对重金属吸附的初步研究黑龙江环境通报26(1):91,15庞杰，刘佩瑛魔芋葡甘聚糖改性剂流变学特性研究成都，西南农业大学博士论文 庞杰,孙远明,冯彤魔芋淀粉改性研究粮食与饲料工业2000(3): 41~42庞杰,孙远明,乐学义,刘佩瑛 六偏磷酸钠对魔芋葡甘聚糖干法改性研究西南农业大学学报 22(1):59~61彭长宏,汪玉庭，程格1998接枝羧基壳聚糖的合成及其对重金属离子的吸附性能环境科学19(5):29~33彭湘红,陆茜,李忠铭,王敏绢多孔球状淀粉接枝共聚物的应用精细石油化工2001(1): 44~青岛海洋大学一种制备甲壳质微球载体的方法CN1145410A1996-03- 19曲荣君,王春华,阮文举多胺交联纤维素树脂的合成及吸附性能(X1)林产化学与工业17(3):19~24全国中草药汇编编写组全国中草药汇编(上)北京,人民卫生出版社, 186邵自强,廖双泉,李晓萌,白松,谭惠民棉纤维蒸汽闪爆改性及其化学反应性能火炸药学报2001(1):44~46山下晋三，金子东助编，纪奎江，刘世平，竺玉书，黄应昌，李德宝等译交联剂手册北京：化学工业出版社51~52四川石油局天然气研究所羟乙基羧甲基魔芋增稠剂 CN1003446B 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邹新禧阴、阳离子化红薯淀粉螯合剂的制备及吸附性能的研究湘潭大学自然科学学报1998(9):87~91朱伯儒,史作清,何炳林大孔球形纤维素离子交换剂的制备及其对蛋白质的吸附富集性能研究Ⅰ大孔球形纤维素的制备研究离子交换与吸附12(6):522~朱伯儒,史作清,何炳林天然高分子吸附剂研究进展天然产物研究与开发8(3):69~ 朱文均1999,魔芋葡甘聚糖的化学改性及其应用性能的研究苏州大学学报(自然科学)15(1):81~86朱玉琴,汤列贵纤维素接枝共聚物化学通报1995(9):18~21朱兆富,刘东强,朱素梅,胡永利,刘宝昌高吸附性甜菜纤维的制备和性能研究中国糖料2002(2):27~29祝志峰交联淀粉囊材对含羧基类除草剂的缓释性能研究高等学校化学学报,22(7):1163~
[1]赵继锋,张运明,颜立红桃源洞自然保护区观赏植物多样性及其主要种类观赏效果评价[J]湖南林业科技,2010,(2)[2]张若晨,陈莲芸,王良民山西太宽河自然保护区野生观赏植物多样性研究[J]中国城市林业,2010,(2)[3]刘青松,黄珂长沙市城市广场园林植物物种多样性调查研究[J]广东园林,2008,(3)[4]文卫华,张灿明,龚玉子湖南野生木本观赏植物多样性特征及利用[J]湖南林业科技,2008,(3)[5]苏维词贵州山区珍稀观赏植物物种多样性濒危现状及保护[J]资源开发与市场,2003,(6)[6]王江,李国辉,黄永强四川野生观赏植物的多样性与可持续利用[J]四川林业科技,2004,
这样的资料也有:1，《 城市道路绿化植物配置 》期刊:《安徽农业科学》 2007年24期作者:张守臣、高正辉、袁超、谷晓翔2，《试论城市道路绿化植物配置单一性和多样性——以乌鲁木齐经济技术开发区（头屯河区）为例 》期刊:《大陆桥视野》 2012年18期作者:季飞3，《 淄博市城市道路绿化植物配置及景观效应研究 》期刊:《山东科学》 -2007年4期作者:李玲资料来源:学术资讯网。
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1]胡永红,黄卫昌 美国植物园的特点──兼谈对上海植物园发展的启示[J] 中国园林,2001,(4) [2]鲍滨福,马军山 两“园”合一 学用并举——浙江林学院植物园规划设计探索[J] 中国园林,2006,(5) [3]李春娇,董丽 试论植物园专类区规划[J] 广东园林,2007,(2) [4]李惠卓,张彦广,吴杨哲,张亮,陈莉瑶,姬鹏,崔容华 保定市植物园土壤特性研究[J] 河北农业大学学报,2004,(4) [5]林昌虎,孙超 加强科普教育建设 扩大植物园生存空间[A] 张治明中国林业出版社[C]: 中国林业出版社,2001: [6]郑金贵 校园多功能教学基地“中华名特优植物园”的建设[J] 福建农林大学学报(哲学社会科学版),2009,(3) [7]胡文芳 人工与自然的科学结合——体验巴塞罗那植物园[J] 中国园林,2005,(3) [8]周练 基于生态休闲文化的南亚热带植物园规划研究[D] 中南林业科技大学: 中南林业科技大学, [9]陈艺芬 论植物园在生物教学中的运用[J] 柳州师专学报,2009,(6) [10]厦门植物园万石阁设计方案[J] 建筑与文化,2008,(3) [11]黄远钧,黄惠明 对园林围墙与园路进行设计与施工的分析[J] 科学之友,2010,(6) [12]张和山 浅谈影响园林绿化施工质量的因素及解决对策[J] 科学之友,2010,(10) [13]李永红,杨倩 杭州西溪湿地植物园——基于有机更新和生态修复的设计[J] 中国园林,2010,(7) [14]郭鸿英,孙超,储蓉 植物园数字化建设[J] 资源开发与市场,2004,(4) [15]孟宪民 沈阳植物园的现状分析及同北京植物园的比较[D] 北京林业大学: 北京林业大学, [16]唐宇丹,靳晓白 植物园的外来种引种和生物安全[A] 张治明中国林业出版社[C]: 中国林业出版社,2001: [17]张晓芹 枸杞在园林中的应用及栽培管理技术[J] 河北农业科学,2007,(2) [18]遆卫国,王晶晶 喷泉在园林造景中的应用[J] 农业科技与信息(现代园林),2007,(7) [19]杨庆绪,蒋三登,张运德,刘毓 园林建设志在环境友好 绿化发展重在资源节约[J] 农业科技与信息(现代园林),2007,(7) [20]尉秋实,李爱德 植物保护、科研、开发三项功能建设的思路与对策[A] 张治明中国林业出版社[C]: 中国林业出版社,2001: [21]Mauro Ballero,Giovanni Piu,Alberto A The impact of the botanical gardens on theaeroplankton of the city of Cagliari, Italy[J] 2000,(1) [22]韦标 试论园林绿化工程施工与养护管理[J] 科学之友,2011,(6) [23]吴徳智 浅谈园林绿化施工中如何提高植树成活率[J] 科学之友,2010,(10) [24]胡永红 专类园在植物园中的地位和作用及对上海辰山植物园专类园设置的启示[J] 中国园林,2006,(7) [25]郦文俊 园林景观栽植中的植物色彩设计研究[J] 农业科技与信息(现代园林),2008,(2) [26]麻广睿 植物园发展与更新规划[D] 北京林业大学: 北京林业大学, [27]金晓雯 园林建筑小品人性化研究[D] 南京林业大学: 南京林业大学, [28]Alessandro Travaglini,Diletta Ravaziol,Maria Grilli C A meteorological station and a pollen trap at the botanical garden and arboretum of the university of Rome Tor Vergata[J] 2000,(2) [29]D Boguslaw Molski,Roman Kubiczek,Jerzy P Rye genetic resources evaluation in the Botanical Garden of the Polish Academy of Sciences in Warsaw[J] 1981,(1) [30]G V Kovaleva,T G Dobrovol’skaya,A V G The structure of bacterial communities in natural and anthropogenic brown forest soils of the Botanical Garden on Murav’eva-Amurskogo Peninsula[J] 2007,(5) [31]Giuseppe V The Popularization of Mycology within the Botanical Garden of Palermo[Z] :1994, [32]李忠实 加强园林施工质量管理浅谈[J] China's Foreign Trade,2011,(12) [33]何勇军 浅谈园林施工过程中的成本控制[J] 科学之友,2010,(6) [34]肖振甲,宋国祥 浅谈园林驳岸工程施工现场管理[J] 科学之友,2010,(14) [35]朱丹粤 浅谈如何做好园林绿化工程施工项目成本管理[J] 华东森林经理,2007,(2) [36]齐海鹰,安吉磊 浅谈观赏草在园林造景中的应用[J] 农业科技与信息(现代园林),2007,(7) [37]郭丹 园林绿化工程造价浅谈[J] 广东园林,2007,(6) [38]计桂珍 浅述避暑山庄的园林艺术[J] 承德职业学院学报,2005,(4) [39]Metal bioaccumulation in plant leaves from an industrious area and the Botanical Garden in Beijing[J] Journal of Environmental Sciences,2005,(2) [40]N Rascio,A Camani,L Sacchetti,I Moro,G Cassina,F Torres,E M Cappelletti,M G P Acclimatization trials of someSolanum species from Amazonas Venezuela at the botanical garden of Padova[J] 2002,(4) [41]Irena M Oles Shevchenko et al in the Botanical Gardens[Z] :1989, [42]A Alfani,G Bartoli,R S Sulphur contamination of soil and Laurus nobilis L leaves in the botanical garden of Naples University[Z] :1983, [43]邵丹锦 一个永续发展的热带风情植物园——新加坡植物园[J] 中国园林,2011,(3) [44]肖春芬,彭艳琼,杨大荣 植物园在物种迁地保护中的作用——以西双版纳热带植物园榕树和榕小蜂的保护为例[J] 中国园林,2010,(5) [45]任康丽 植物园景观设计功能性与艺术性的高度结合——从美国费尔柴尔德热带植物园看景观设计的组构[J] 中国园林,2010,(9) [46]李忠超,陈红锋 我国植物园新时期科学普及工作的思考——以中国科学院华南植物园为例[J] 福建林业科技,2006,(3) [47]欧阳欢,王庆煌,黄根深,龙宇宙,宋应辉 科研、开发、旅游三位一体新型植物园的创建——以兴隆热带植物园为例[J] 中国生态农业学报,2007,(4) [48]孟宪民 国外植物园发展现状及对我国植物园建设的启示[J] 世界林业研究,2004,(5) [49]任海,简曙光,张征,郑祥慈,张奠湘,王峥峰,郝刚,段俊,廖景平,魏孝义,傅德志 数字化植物园的理论与技术思考—以华南植物园为例[J] 热带亚热带植物学报,2004,(5) [50]林有润 植物园,“植物系统与工程学”科学研究与实验的基地———兼论《巨系统》理论对植物园建设及对植物科学研究工作的指导意义[J] 植物研究,1998,(4)
你只是毕业论文，要求没有学术论文那么高，学术论文主要是因为考虑到知识产权，侵权之类的问题，所以，必须把每一份参考文献都标明，但是，只要在末尾标注了，就可以在正文中不注释，因为，正文中太多的标注，会给人感觉，你这篇学术论文似乎是大染缸，似乎是别人的成果拼凑而成，所以，很多从命的学者，喜欢统一放在论文末了，一来，没有很多人关心，二来，
1]胡永红,黄卫昌 美国植物园的特点──兼谈对上海植物园发展的启示[J] 中国园林,2001,(4) [2]鲍滨福,马军山 两“园”合一 学用并举——浙江林学院植物园规划设计探索[J] 中国园林,2006,(5) [3]李春娇,董丽 试论植物园专类区规划[J] 广东园林,2007,(2) [4]李惠卓,张彦广,吴杨哲,张亮,陈莉瑶,姬鹏,崔容华 保定市植物园土壤特性研究[J] 河北农业大学学报,2004,(4) [5]林昌虎,孙超 加强科普教育建设 扩大植物园生存空间[A] 张治明中国林业出版社[C]: 中国林业出版社,2001: [6]郑金贵 校园多功能教学基地“中华名特优植物园”的建设[J] 福建农林大学学报(哲学社会科学版),2009,(3) [7]胡文芳 人工与自然的科学结合——体验巴塞罗那植物园[J] 中国园林,2005,(3) [8]周练 基于生态休闲文化的南亚热带植物园规划研究[D] 中南林业科技大学: 中南林业科技大学, [9]陈艺芬 论植物园在生物教学中的运用[J] 柳州师专学报,2009,(6) [10]厦门植物园万石阁设计方案[J] 建筑与文化,2008,(3) [11]黄远钧,黄惠明 对园林围墙与园路进行设计与施工的分析[J] 科学之友,2010,(6) [12]张和山 浅谈影响园林绿化施工质量的因素及解决对策[J] 科学之友,2010,(10) [13]李永红,杨倩 杭州西溪湿地植物园——基于有机更新和生态修复的设计[J] 中国园林,2010,(7) [14]郭鸿英,孙超,储蓉 植物园数字化建设[J] 资源开发与市场,2004,(4) [15]孟宪民 沈阳植物园的现状分析及同北京植物园的比较[D] 北京林业大学: 北京林业大学, [16]唐宇丹,靳晓白 植物园的外来种引种和生物安全[A] 张治明中国林业出版社[C]: 中国林业出版社,2001: [17]张晓芹 枸杞在园林中的应用及栽培管理技术[J] 河北农业科学,2007,(2) [18]遆卫国,王晶晶 喷泉在园林造景中的应用[J] 农业科技与信息(现代园林),2007,(7) [19]杨庆绪,蒋三登,张运德,刘毓 园林建设志在环境友好 绿化发展重在资源节约[J] 农业科技与信息(现代园林),2007,(7) [20]尉秋实,李爱德 植物保护、科研、开发三项功能建设的思路与对策[A] 张治明中国林业出版社[C]: 中国林业出版社,2001: [21]Mauro Ballero,Giovanni Piu,Alberto A The impact of the botanical gardens on theaeroplankton of the city of Cagliari, Italy[J] 2000,(1) [22]韦标 试论园林绿化工程施工与养护管理[J] 科学之友,2011,(6) [23]吴徳智 浅谈园林绿化施工中如何提高植树成活率[J] 科学之友,2010,(10) [24]胡永红 专类园在植物园中的地位和作用及对上海辰山植物园专类园设置的启示[J] 中国园林,2006,(7) [25]郦文俊 园林景观栽植中的植物色彩设计研究[J] 农业科技与信息(现代园林),2008,(2) [26]麻广睿 植物园发展与更新规划[D] 北京林业大学: 北京林业大学, [27]金晓雯 园林建筑小品人性化研究[D] 南京林业大学: 南京林业大学, [28]Alessandro Travaglini,Diletta Ravaziol,Maria Grilli C A meteorological station and a pollen trap at the botanical garden and arboretum of the university of Rome Tor Vergata[J] 2000,(2) [29]D Boguslaw Molski,Roman Kubiczek,Jerzy P Rye genetic resources evaluation in the Botanical Garden of the Polish Academy of Sciences in Warsaw[J] 1981,(1) [30]G V Kovaleva,T G Dobrovol’skaya,A V G The structure of bacterial communities in natural and anthropogenic brown forest soils of the Botanical Garden on Murav’eva-Amurskogo Peninsula[J] 2007,(5) [31]Giuseppe V The Popularization of Mycology within the Botanical Garden of Palermo[Z] :1994, [32]李忠实 加强园林施工质量管理浅谈[J] China's Foreign Trade,2011,(12) [33]何勇军 浅谈园林施工过程中的成本控制[J] 科学之友,2010,(6) [34]肖振甲,宋国祥 浅谈园林驳岸工程施工现场管理[J] 科学之友,2010,(14) [35]朱丹粤 浅谈如何做好园林绿化工程施工项目成本管理[J] 华东森林经理,2007,(2) [36]齐海鹰,安吉磊 浅谈观赏草在园林造景中的应用[J] 农业科技与信息(现代园林),2007,(7) [37]郭丹 园林绿化工程造价浅谈[J] 广东园林,2007,(6) [38]计桂珍 浅述避暑山庄的园林艺术[J] 承德职业学院学报,2005,(4) [39]Metal bioaccumulation in plant leaves from an industrious area and the Botanical Garden in Beijing[J] Journal of Environmental Sciences,2005,(2) [40]N Rascio,A Camani,L Sacchetti,I Moro,G Cassina,F Torres,E M Cappelletti,M G P Acclimatization trials of someSolanum species from Amazonas Venezuela at the botanical garden of Padova[J] 2002,(4) [41]Irena M Oles Shevchenko et al in the Botanical Gardens[Z] :1989, [42]A Alfani,G Bartoli,R S Sulphur contamination of soil and Laurus nobilis L leaves in the botanical garden of Naples University[Z] :1983, [43]邵丹锦 一个永续发展的热带风情植物园——新加坡植物园[J] 中国园林,2011,(3) [44]肖春芬,彭艳琼,杨大荣 植物园在物种迁地保护中的作用——以西双版纳热带植物园榕树和榕小蜂的保护为例[J] 中国园林,2010,(5) [45]任康丽 植物园景观设计功能性与艺术性的高度结合——从美国费尔柴尔德热带植物园看景观设计的组构[J] 中国园林,2010,(9) [46]李忠超,陈红锋 我国植物园新时期科学普及工作的思考——以中国科学院华南植物园为例[J] 福建林业科技,2006,(3) [47]欧阳欢,王庆煌,黄根深,龙宇宙,宋应辉 科研、开发、旅游三位一体新型植物园的创建——以兴隆热带植物园为例[J] 中国生态农业学报,2007,(4) [48]孟宪民 国外植物园发展现状及对我国植物园建设的启示[J] 世界林业研究,2004,(5) [49]任海,简曙光,张征,郑祥慈,张奠湘,王峥峰,郝刚,段俊,廖景平,魏孝义,傅德志 数字化植物园的理论与技术思考—以华南植物园为例[J] 热带亚热带植物学报,2004,(5) [50]林有润 植物园,“植物系统与工程学”科学研究与实验的基地———兼论《巨系统》理论对植物园建设及对植物科学研究工作的指导意义[J] 植物研究,1998,(4)
不用，课程设计就是抄。
我也是刚做完毕业论文，也算是过来人了，对这个还算是比较了解：尤其是在近来全国高校教学评估的大背景下，毕业论文中所有的参考文献都是需要在正文中标注的，要不然你的指导老师肯定会让你一而再再而三的修改的受到启发的文章当然也可列为参考文献，因为你既然受到了启发，你就应该把启发的背景介绍一下，这必然就是参考文献的内容，所以同样应该标注的
中国科学院中国植物志编辑委员会 中国植物志[M] 北京: 科学出版社, 1993: [序号]作者书名[M]出版地：出版社，出版年份：起止页码
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收稿日期：2007-10-25基金项目：深圳市科技和信息局基金资助项目作者简介：王丹（1982-），女，辽宁本溪人，硕士研究生，从事植物生物技术研究。注：雷江丽为通讯作者。大花美人蕉茎尖组织培养技术研究王 丹1,2，雷江丽2，吴燕民3，吕 慧2，郁继华1(甘肃农业大学 农学院，甘肃 兰州 730070；深圳市园林科学研究所，广东 深圳 518003；中国农业科学院 生物技术研究所，北京 100081)摘 要：以大花美人蕉（Canna×generalis）根茎茎尖为外植体进行组织培养技术研究，筛选出芽诱导适宜的培养基为MS + 6-BA 0mg/L（单位下同）+ TDZ 03；MS + 6-BA 0 + TDZ 03 + NAA 1 培养基能较好地诱导分化出丛生芽, 继代增殖培养中与MS + 6-BA 0 + TDZ 03 + NAA 1 培养基交替使用可减少畸形芽，增殖系数达67；适宜的生根培养基为MS + 6-BA 0 + NAA 5，生根率达67%，且植株生长健壮，移栽易成活。关键词：大花美人蕉；茎尖；组织培养中图分类号：Q1 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2008)01-0033-04Research on Shoot-tip Culture of Canna×generalisWANG Dan1,2, LEI Jiang-li2, WU Yan-min3, LÜ Hui2, YU Ji-hua1(College of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Gansu China; Shenzhen Institute of LandscapeGardening, Shenzhen 518003, Guangdong China; Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of AgriculturalSciences, Beijing 100081, China)Abstract: The paper mainly studied on tissue culture of Canna×generalis with the stem tips The results showed that the bud inoculation medium was MS + 6-BA 0mg/L+ TDZ03mg/L; the best of clump shoot induction and differentiation medium was MS + 6-BA 0mg/L +TDZ 03mg/L + NAA 1mg/L; using MS + 6-BA 0mg/L + TDZ 03mg/L + NAA 1mg/L asproliferation medium, an optimal proliferation rate was When the two kinds of mediumused alternatively, the effect was The optimum rooting medium was MS + 6-BA 0mg/L +NAA 5mg/L, the rate of rooting could reach 67%, and cultured in this medium, the plant grewwell and easy to Key words: Canna×generalis; shoot-tip; tissue culture大花美人蕉(Canna×generalis)属美人蕉科(Cannaceae)美人蕉属(Canna)的园艺杂交种[1]，是多年生喜光宿根草本花卉，原产美洲热带和非洲等地。其枝叶茂盛、花朵艳丽、姿态优美、花期长，在深圳地区几乎全年开花，是配置大型花坛的优良品种。大花美人蕉不仅观赏价值高，而且能吸收硫、氯、氟、汞等有害物质，具有净化空气、保护环境的作用，因此，世界许多城市的园林绿化中都广泛应用。美人蕉传统的繁殖方式主要采用分切地下根茎的方法，繁殖速度慢、增殖效率低，而且连续营养繁殖造成病毒积累致使病毒病在各地相当普遍，严重影响其观赏价值。利用茎尖组织培养进行脱毒试管苗快繁，是目前大力繁殖与推广美人蕉的主要手段。关于美人蕉组织培养的研究报道较少[2,3]，本研究探索其组织培养高效的再生体系，以期为品种提纯复壮及遗传转化、性状改良奠定基础。2008,37(1):33-Subtropical Plant Science第·34· 37 卷1 材料与方法1 材料供试材料为目前城市绿化中普遍应用的大花美人蕉‘President’品种。2 外植体选择与处理选择生长健壮、无病虫害的优良母株，挖取带芽胞的根茎，去除表面老皮并用肥皂水清洗。用75%乙醇棉擦拭，然后采用不同的消毒剂及处理时间（1%升汞10min、2%次氯酸钠10min、2%次氯酸钠20min、2%次氯酸钠 + 1%升汞5min、2%次氯酸钠 + 1%升汞10min），封闭式振摇灭菌。无菌水冲洗5 次，置于超净工作台上备用。接种前，剥去外部叶片，露出生长点，立即切取茎尖进行接种。3 培养方法及培养条件试验于2006 年10 月在深圳市园林科学研究所组培室进行。诱导、增殖和生根培养基均选用MS为基本培养基，在不同培养阶段附加不同种类、不同浓度配比的植物生长调节剂（表2～表4），蔗糖3%，pH 8。培养温度(28±2)℃，光照强度2 500 lx，光照周期为14h/d，相对湿度70%～80%。每处理接种30 瓶。定期观察试管苗生长与分化情况。2 结果与分析1 不同消毒处理方式对外植体无菌化的影响因供试外植体取自美人蕉地下根茎，表面污染物较多，不易消毒，且不同植物及外植体的成熟度对消毒剂的反应不同，故本试验选用升汞和次氯酸钠进行灭菌效果比较，以筛选合适的消毒剂及消毒处理时间。由表1 可知，2%次氯酸钠20min 处理的无菌化效果较好，但茎尖褐化较严重，说明灭菌时间过长对去老皮后的幼嫩根茎影响较大。1%升汞10min 处理与2%次氯酸钠 + 1%升汞 10min处理，无菌化效果差异不大，但2%次氯酸钠 + 1%升汞 10min 处理有轻微药害。因此，后续实验选用1%升汞处理10min 进行外植体消毒。2 不同生长调节剂配比对芽诱导的影响以MS 为基本培养基，附加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D、KT、TDZ 等（表2），以筛选出较适宜美人蕉茎尖诱导分化的配方。因美人蕉根茎具有休眠特性，芽诱导分化较难。TDZ 具有很强的促进细胞分裂活性，05～0μmol/L 即可有效促进分化[4]，因此，本实验对TDZ 的诱导效果进行初步探索。试验表明，在不添加任何生长调节剂的MS 基本培养基（1 号）上，茎尖接种10d 后开始生长，叶片展开后，生长停止；15d 后转接到新的MS 培养基上无明显生长，随后叶片逐渐变黄、萎蔫，说明基本培养基中添加生长调节剂是美人蕉离体培养的必要条件。在仅添加6-BA 的2、3、4 号培养基中，高浓度的2 号培养基分化率为33%，明显好于3、4号培养基，说明美人蕉启动芽诱导分化需要高浓度的细胞分裂素（表2）。11～16 号培养基添加物为不同生长调节剂与TDZ 组合（表2）。仅添加TDZ 的培养基分化率为0，而多种生长调节剂配合使用分化效果更好[5]。其中15 号培养基的侧芽分化率最高，达33%，且每个茎尖可增殖2～3 个侧芽，但个别茎尖经多次转接后有畸形芽；与2 号培养基相比，分化率明显提高，说明添加低浓度TDZ 可促进芽诱导分化（表2）（图版-a）。5、6、7 号培养基为生根培养基，探讨NAA 对美人蕉茎尖生长和生根的影响。试验结果初步说明美人蕉在6-BA/NAA 小于2/5 时生根率可达50%以上（表2）。8、9、10 号培养基，探讨美人蕉脱分化，诱导愈伤组织，但结果均不理想。因此，建立高效的美表1 不同消毒剂及处理时间对外植体无菌化的影响处 理 接种数污染数污染率(%) 药害情况1%升汞10min 30 5 67 基本无药害2%次氯酸钠10min 30 12 00 无药害2%次氯酸钠20min 30 4 33 20%有轻微药害2%次氯酸钠+1%升汞5min 30 10 33 3%有轻微药害2%次氯酸钠+1%升汞10min 30 5 67 7%有药害第1 期 王丹,等：大花美人蕉茎尖组织培养技术研究 ·35·人蕉遗传转化再生体系还需进一步探索愈伤组织诱导途径。3 芽继代增殖为了探讨优化的芽继代增殖培养基配方，按表3 设计6-BA、NAA、TDZ 的正交实验，以15 号培养基上分化出的丛生芽为接种材料，进行继代增殖培养（图版-b）。由表3 可见，除17、18 号培养基外，低浓度TDZ（03mg/L）的分化促进作用较高浓度（3mg/L）的效果好，说明高活性的TDZ 浓度过高反而抑制分化。当TDZ03mg/L 时, NAA 1mg/L 促分化作用显著优于NAA5mg/L。在TDZ、NAA 浓度相同的情况下，随着6-BA 浓度的升高，分化率提高。但随着继代次数的增多，含高浓度6-BA的27 号培养基分化率略有下降，甚至有个别畸形芽产生，说明高浓度细胞分裂素对短期的分化有促进作用[9]，但继代数次后，芽已经萌动，自身具有分化能力，需适当降低6-BA 浓度进行壮苗，以避免畸形芽产生。因此，在增殖过程中交替使用分化增殖系数较高的19 号培养基和27 号培养基，既可保证较高的芽分化率，又可使继代苗生长健壮，减少畸形芽。4 生根诱导增殖芽3～5cm 长时，转接到生根培养基上培养约10d 后，可见到根生成（图版-c）。接种20d 后统计生根结果（表4）。从表4可见，所用培养基上都有根生成，说明美人蕉生根较容易；结合生根率和生长势，我们认为MS + 6-BA 0 + NAA 5培养基较适宜美人蕉生根。表2 不同植物生长调节剂组合的比较植物生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA 2,4-D KT TDZ分化率(%) 生根率(%) 备注1 0 0 0 0 02 9 0 0 0 0 33 参考[2]3 5 0 0 0 0 33 参考[3]4 3 0 0 0 0 675 2 1 0 0 0 006 2 5 0 0 0 677 2 2 0 0 0 08 0 0 4 0 09 0 0 2 1 0 参考[6]10 0 2 0 2 0 参考[7]11 0 0 0 0 2 012 0 1 0 0 2 33 参考[8]13 0 0 5 0 1 3314 0 0 1 0 1 6715 8 0 0 0 03 3316 5 0 5 0 03 00表3 不同生长调节剂配比对芽继代繁殖的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA TDZ接种数分化率(%)增值系数 生长势17 0 5 03 30 00d 20d ++18 0 5 30 30 67cd 50bc ++19 0 1 03 30 67a 67a ++20 0 1 30 30 33cd 46bc ++21 0 5 03 30 33c 60ab ++22 0 5 30 30 67d 33c ++23 0 1 03 30 67a 60ab ++24 0 1 30 30 33ab 57b +25 0 5 03 30 00b 53b ++26 0 5 30 30 67d 37c +27 0 1 03 30 00a 73a ++28 0 1 30 30 67d 37c +注：++ 表示生长势强；+表示生长势弱。同列中不同字母表示差异显著(P＜05＝，表4 同。表4 不同的生长调节剂配比对组培苗生根的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA接种数生根苗数生根率(%)植株生长势29 0 5 30 19 33b +30 0 0 30 21 00a ++31 0 5 30 20 67ab +++32 0 0 30 16 33c ++注：+++ 表示生长势强；++表示生长势中等；+表示生长势弱。第·36· 37 卷3 结 论美人蕉根茎生长在土壤中，无菌化操作较困难。灭菌试验表明，1%升汞震荡灭菌10min 效果较好，采回的外植体应尽快处理接种，放置时间过长伤口处易染菌，导致接种后褐化较严重。MS + 6-BA 0 + ZDT 03 + NAA 1 培养基能较好地诱导分化丛生芽，MS + 6-BA 0 + TDZ 03+ NAA 1 为较好的增殖培养基，在增殖培养过程中这两种配方交替使用效果更好；短时间使用高浓度生长调节剂对增殖有促进作用，但长时间使用高浓度生长调节剂会使组培苗质量下降。在试验中还发现，转接次数多的茎尖较转接次数少的分化率大，建议在接种后的10～20d 内及时转接。选用MS + 6-BA 0 + NAA 5 为生根培养基，生根率较高，根系粗壮、根毛密集，植株生长健壮（图版-d），且移栽成活率较高。参考文献:[1] Segeren W, et The genus Canna in Northern South America[J] Acta Bot N, 1971,20(6): 663-[2] 刘文萍,等 美人蕉茎尖组织培养及快繁技术[J] 北方园艺, 2001(6): [3] 丁爱萍,等 美人蕉组织培养及快速繁殖技术[J] 园林科技, 2006(1): 11-[4] Singh N D, et The effect of TDZ on organogenesis and somatic embryogenesis in pigeonpea (Cajanus cajan L Millsp)[J]Plant Science, 2003,164(3): 341-[5] 王关林,等 高活性细胞激动素TDZ 在植物组织培养中的应用[J] 植物学通报, 1997,14(3): 47-[6] 宣朴,等 生姜茎尖组培快繁技术研究[J] 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