外源保幼激素类似物对白蜡虫泌蜡和发育的影响

白蜡虫(Ericerus pela Chavannes)在分类上属于半翅目(Hemiptera)，蚧总科(Coccoidea)白蜡蚧属(Ericerus)[1]。白蜡虫是一种具有重大经济价值的资源昆虫，2龄雄幼虫分泌的白蜡主要成分为二十六酸二十六酯(C25H51COOC26H53)，在中国已有上千年的历史，广泛应用于化工、机械、医药、食品等行业，提高白蜡产量推动经济发展，发展白蜡需要大量寄主植物，对于改善环境也具有重要的生态、经济和社会效益[2]。

白蜡虫生活周期为1年1代，存在两性生殖和孤雌生殖[3]。白蜡虫雄虫发育经若虫、前蛹、蛹和成虫阶段，属于完全变态[1]，雄虫喜阴，1龄到2龄从寄主叶背面转移到枝干，1龄和2龄初期虫体角质化并有少许蜡丝覆盖，2龄中后期达到泌蜡高峰期[4]。2龄雄虫泌蜡包括复杂的生态和生理问题，为适应复杂的生态环境过程中产生泌蜡等生理现象，主要受到湿度、光照的影响，且呈现高湿度、低光照地区白蜡虫泌蜡量高的趋势[5-6]。白蜡虫2龄雄幼虫的泌蜡合成途径已有前期理论基础[7]，自然种群间缺乏杂交(基因交流)，扩散力较低，证实白蜡虫在生产上具有安全性[8]。

“买”作为一个动词，它表示“买入”，具有“取得”义，但在进入双及物构式后，就具有了“买入+给出”的意义，这个“给出”的意义就是双及物构式所赋予的。再比如，英语中的“refuse”“build”“make”“cook”“knit”“pour”“bake”“sing”等词，它们都是“非给”类动词，这些动词本身不具备表达“传递”的意义，但它们进入双及物构式后，就变成了表达“给予”意义的动词。

保幼激素是昆虫咽侧体分泌的一种倍半萜烯类物质，是一种生长调节剂，调控昆虫生命周期中每一个重要发育阶段的转变，在昆虫发育的临界期高浓度保幼激素会阻碍变态提前发生[8-10]。目前，已发现外源保幼激素类似物也可控制昆虫的生殖[11-13]、发育[14-18]以及生理[19-20]等过程，但对白蜡虫这一资源昆虫目前还未涉及研究，本研究以外源保幼激素类似物对白蜡虫雄虫的生理和发育的控制为主线进行展开。

待伏，是我方人员在各种违法分子行动之前，准确地掌握其行动经过的路线、地段、到达的地点、时间和人员数量，预先将兵力隐蔽地埋伏在便于伏击敌人的某一特定地域，待到违法分子到达后，突然将其捕歼的一种战术。

在昆明和四川峨眉地区，JH2在喷施、涂干和注射3种处理下对白蜡虫的个体泌蜡量均表现出促进作用，且喷施处理昆明(41.50 mg·头-1)和峨眉地区(25.56 mg·头-1)白蜡虫个体泌蜡量的增产率比涂干和注射处理的高。

在选取特征点匹配的算法时要考虑与其搭配的特征点提取算法，使用特征提取过程得到的特征描述符(DESCRIPTOR)数据类型有的是FLOAT类型的，比如说：SURF，SIFT，有的是UCHAR类型的，比如说有ORB，BRIEF。对应FLOAT类型的匹配方式有：FLANNBASEDMATCHER，BRUTEFORCE等。对应UCHAR类型的匹配方式有：BRUTEFORCE。所以ORB特征描述子只能使用BRUTEFORCE匹配法。另外还有一种相对于更加传统的SURF+FLANN的方法。

1 材料与方法

1.1 供试虫源

图2B表明：在喷施处理下，JH2与CK、JH0、JH1、JH3之间均存在极显著差异；在涂干处理下，JH1与CK之间存在极显著差异，而JH2、JH3与CK之间存在显著差异；在注射处理下，各个浓度下白蜡虫个体泌蜡量与CK之间均存在显著差异，但各浓度之间其差异不显著。

 

表1 2不同地区气候指标[4]Table 1 Climate indicators in two different regions[4]

  

气候条件Climaticconditions昆明Kunming峨眉Emei海拔Altitude/m18001900460年均温度Annualaveragetemperature/℃14.8017.205—8月温度Thetemperaturefrom5to8/℃20.7623.08相对湿度Relativehumidity/%73.0085.005—8月光照时数Illuminationhours/h700.5423.7年光照时数Annualilluminationhours/(h·a-1)2400250013001400

1.2 实验仪器及试剂

梅特勒-托利多分析天平购自梅特勒-托利多国际有限公司；丙酮(95%)为国产分析纯，购自南京化学试剂股份有限公司；保幼激素类似物(JHA，吡丙醚，≥99.0%)购自成都艾德化工有限公司。

1.3 试验设计

经预实验后将外源保幼激素类似物用1%丙酮稀释成高(JH3)、中(JH2)、低(JH1)3种不同浓度(25、2.5、1.25 mg·mL-1)。根据白蜡虫若虫习性，在2龄期雄幼虫期初期虫体轻微角质化且有蜡丝覆盖(图1)时进行试验处理。采用喷施、注射、涂干3种不同方法进行外源保幼激素处理，每个虫体使用量约3 μL。

2.2.2 体长 表4表明：不同浓度的外源保幼激素类似物在喷施和涂干处理下均对白蜡虫蛹体长发育表现为抑制作用，且随着外源保幼激素浓度的增加其抑制作用增强，且与CK之间均差异显著；在JH1处理下，涂干处理的抑制强度高于喷施处理，且差异显著；而在JH2、JH3处理中，喷施和涂干处理的抑制效果差异不显著。

1.3.2 注射 将外源保幼激素类似物用1%丙酮稀释成不同浓度后，用注射器将保幼激素类似物溶液注射在白蜡虫取食点附近枝条的韧皮部。

1.3.3 涂干 将外源保幼激素类似物用1%丙酮稀释成不同浓度后，用毛笔直接涂抹在虫体上。

对照组分别用同体积的1%丙酮代替保幼激素类似物，按整株和同株不同枝条设置对照(JH0)，同时保留3株不加任何处理作为空白对照(CK)，每种浓度、方法处理分别设置10次重复。

我的婀娜美艳，让身边的树都不敢直视。我的万般风情，使我成了西庄山的圣树，西庄坪人的骄傲。现在坪里胡子花白的老人，都是我看着从穿开裆裤长大的。我见证了西庄坪两百多年的历史，从看见三五个人来到这片荒野，到陆续发展到三五十户人家；从男人们蓄着辫子穿着长衫，到剃成短发穿上中山装；从农业学大寨的热闹鼎沸，到联产承包的自豪激情；一直到当下人口外流，农田抛荒后的退耕还林。

  

A： 1龄雄幼虫定叶；B： 2龄雄幼虫定杆初期；C： 2龄雄幼虫泌蜡高峰期。A： 1 instar male larvas fixed on leaves; B： 2 instar male larvas prime “stem”; C： the peak time of wax secretion 2 instar male larvas.图1 白蜡虫雄虫“定叶”和“定杆”Fig.1 Males of E. pela “fixed on leaves” and “stem”

1.4 数据收集与分析

1.4.1 泌蜡测定 在泌蜡结束时(前蛹期)将蜡块从树上取下，根据性状分块切割为2 cm2以内的长方形或正方形，测定蜡块的长度和宽度，计算蜡块的面积，20℃烘箱中烘干水分，称蜡块质量，然后挑出雄虫计数，称质量，计算单位面积个体泌蜡质量，用下列公式换算出白蜡虫个体泌蜡质量(mg·头-1)。

2.政出多门，管理不力。调研中还发现有些省份对中药产业的管理存在多头管理、政出多门等问题。一件事情由多个部门在管理，如工信、发改委、科技、农业、食药监、卫计委等，是真正的九龙治药情况。这样难免出现责任不清、相互扯皮推诿、工作效率不高等问题，体制不畅，政出多门，严重影响和制约产业的发展。

个体泌蜡质量=(单位面积泌蜡质量-虫质量)/白蜡虫数目

增产率=(JHA处理后个体泌蜡质量-自然泌蜡质量)/自然泌蜡质量×100%

2) 系统默认的初始温度为43 ℃，末端形式考虑用户的舒适性需求，采用地板辐射采暖，系统出水温度设定45 ℃；

羽化率=成虫/(成虫+蛹)×100%

1.4.3 数据分析 利用SPSS软件对不同浓度和处理的白蜡虫雄虫泌蜡量、羽化率以及体质量、体长在多重比较(LSD)P<0.05水平进行差异显著性分析。

2 结果分析

2.1 个体泌蜡量

2.2.1 羽化率 表3表明：不同浓度的保幼激素类似物在喷施和涂干处理下都表现出不同程度的促进作用，羽化率达62.70%81.62%。喷施和涂干2种处理中，高浓度保幼激素类似物JH3的促进作用明显比JH1和JH2的高；在同一浓度不同处理下，涂干处理表现出的促进作用高于喷施处理。试验结果表明：保幼激素类似物可以提高白蜡虫蛹的羽化率，这一结果也说明白蜡虫蛹的羽化率与外源保幼激素之间也存在着密切的联系。

供试昆虫为白蜡虫2龄雄幼虫。试验地点：昆明地区位于102°37′ E，27°26′ N，四川峨眉地区位于103°21′ E，29°28′ N。

在云南昆明和四川峨眉地区，JH2在喷施处理下，白蜡虫个体泌蜡量增加且与CK均表现出显著性差异。

在不同处理下，2地区白蜡虫个体泌蜡量在不同浓度外源保幼激素类似物处理下增产率也表现出差异性(表2)。

胆汁淤积症常以瘙痒为首发症状，发生无皮肤损伤的瘙痒，一般孕妇在孕30周后开始出现，个别甚至更早。瘙痒程度不一，常呈持续性，白昼轻，夜间较剧。瘙痒一般最先从手掌和脚掌开始，然后逐渐向近端延伸甚至可发到面部、颈部和耳朵，瘙痒于分娩后数小时或数日内消失。

在昆明地区，JH0、JH1、JH3在喷施、涂干和注射3种处理下，对白蜡虫的个体泌蜡量表现出不同程度的抑制作用；JH2在在喷施、涂干和注射3种处理下，对白蜡虫的个体泌蜡量表现出促进作用，增产率为4.02%41.50%，且JH2在喷施处理下白蜡虫个体泌蜡量增产率最高。四川峨眉地区，JH0、JH1、JH2、JH3在喷施、涂干和注射3种处理下，对白蜡虫的个体泌蜡量均表现出促进作用，增产率为9.84%33.76%。

  

不同大写字母表示差异显著(P<0.05)；不同小写字母表示差异极显著(P<0.01)。Capital letters indicate P<0.05, indicated significant difference; lowercaed indicate P<0.01 extremely significant difference.图2 2地区不同浓度JHA处理后白蜡虫个体泌蜡量Fig.2 Individual wax secretion of E. pela under different concentrations of JHA treatment in two regions

 

表2 2地区不同浓度处理下白蜡虫个体泌蜡量增产率

 

Table 2 The growth rate of individual wax secretion of E. pela under different concentrations of JHA

 

treatment in two regions

  

试验号Testnumbers喷施Spraying增产率Rateofgrowth/%昆明Kunming峨眉Emei涂干Smearingstem增产率Rateofgrowth/%昆明Kunming峨眉Emei注射Injection增产率Rateofgrowth/%昆明Kunming峨眉EmeiJH0-4.6310.53-0.5212.12-2.5424.90JH1-12.8218.98-6.3733.76-27.629.84JH241.5025.568.4224.764.0211.97JH3-32.1210.14-16.216.69-44.1116.44

注：“-”表示负增长。

Note: “-” means negative growth.

本研究主要目的：(1)采用喷施、涂干、注射3种处理方式，哪种对白蜡虫泌蜡量增加更有效？(2)采用外源激素类似物高、中、低3种浓度方式，哪种浓度能达到最好的增产效果？(3)采用外源激素类似物高、中、低3种浓度方式在喷施和涂干处理下，白蜡虫雄虫蛹的发育情况？从这3个目的出发探讨外源保幼激素对白蜡虫2龄雄幼虫泌蜡量和蛹发育的影响，为扩大白蜡生产和后续推广工作积累试验数据与技术储备，也为白蜡虫的培育和种群的扩大提供参考。

2.2 峨眉地区白蜡虫蛹的羽化率、体质量和体长的变化

高、中、低3种保幼激素类似物分别采用喷施、涂干和注射3种方法处理白蜡虫2龄雄幼虫种群，与自然状态下2龄雄幼虫的个体泌蜡量(CK)进行比对。图2A表明：在喷施处理下，JH2与CK、JH0、JH1、JH3之间均存在极显著差异，而JH0、JH1与CK之间差异不显著；在涂干处理下，JH1、JH2、JH3、JH0与CK之间差异均不显著，仅JH2与CK差异显著；在注射处理下，JH3与CK、JH0、JH2之间存在显著差异。

1.4.2 羽化率、体质量以及体长的测定 主要分析喷施和涂干处理下，峨眉地区的白蜡虫。羽化率的测定，在泌蜡结束后(蛹期)将蜡块从树上取下，分块切割为2 cm2以内的长方形或正方形，然后挑出成虫和蛹，进行计数、称质量和测量。

 

表3 不同浓度和处理方法下白蜡虫蛹的羽化率Table 3 Eclosion rate of E. pela under differentconcentrations of JHA and processing methods %

  

试验号Testnumbers喷施Spraying涂干SmearingstemJH037.5145.05JH162.7071.28JH262.7966.76JH366.4381.62CK62.4562.45

1.3.1 喷施 将外源保幼激素类似物用1%丙酮稀释成不同浓度后，直接喷施在虫体上。

 

表4 不同浓度和处理方法下白蜡虫蛹的个体体长Table 4 individual body length of E. pela pupae underdifferent concentrations of JHA and treatments

  

试验号喷施Spraying涂干SmearingstemTestnumbers体长Bodylength/mm体长Bodylength/mmJH02.4790±0.03581bA2.5071±0.05115aAJH12.4493±0.006135bA2.2395±0.07571bcBJH22.0811±0.001018cdA2.1563±0.009207cAJH31.9864±0.02453dA1.9603±0.006137dACK2.6524±0.1392a2.6524±0.1392a

注：不同小写字母表示在不同浓度同一处理下差异显著(P<0.05),不同大写字母表示在同一浓度不同处理下差异显著(P<0.05)，下同。

Note: Mean±standard deviation is given in the table data, different lowercase letters indicate under different concentrations of JHA and same treatment significant difference(p<0.05), different capital letters indicate under same concentrations of JHA and different treatment significant difference (p<0.05). The same below.

2.2.3 个体质量 从JH0数据分析，丙酮对蛹的个体质量存在抑制作用，与CK存在显著差异。在不同浓度同一处理下，高、中、低保幼激素类似物在喷施处理下，JH3对蛹的个体质量表现出了抑制作用，与CK和JH0存在显著差异；高、中、低保幼激素类似物在涂干处理下，JH1和JH2对蛹的个体质量发育起到促进作用，但相对CK而言，JH3对蛹的个体质量起到抑制作用，与CK之间存在显著差异；在同一浓度不同处理下，2处理之间蛹个体质量均表现出显著差异。保幼激素类似物对白蜡虫蛹个体质量的影响，在低浓度的范围内，表现出促进作用，达到一定浓度后表现出抑制作用(表5)。

 

表5 不同浓度和处理方法下白蜡虫蛹个体质量Table 5 Individual body weight of E. pela pupae underdifferent concentrations of JHA and treatments

  

试验号喷施Spraying涂干SmearingstemTestnumbers个体质量Bodylength/mg个体质量Bodylength/mgJH00.7037±0.03744bA0.4873±0.06828cBJH10.7327±0.03068bB0.9436±0.03834aAJH20.7386±0.04929bB0.8541±0.07161bAJH30.3750±0.04574cB0.5190±0.05090cACK0.8256±0.04322a0.8256±0.04322b

3 讨论

3.1 JHA对白蜡虫泌蜡的影响

2龄雄幼虫是泌蜡高峰期，自然界中，湿度和光照也是影响白蜡虫泌蜡的主要因素，根据气象统计资料显示，白蜡虫在泌蜡时期(5—8月份)昆明的相对湿度高于峨眉地区[5-6]。本研究中，施用JHA影响白蜡虫个体泌蜡量存在一个浓度石闸，中、低浓度(2.5、1.25 mg·mL-1)JHA施用对白蜡虫个体泌蜡的促进作用较明显，且中等浓度相对优于低等浓度，高浓度JHA(25 mg·mL-1)施用对白蜡虫个体泌蜡无效或起抑制作用；就3种不同处理方式而言，采用涂干与喷施JHA对白蜡虫泌蜡有明显促进作用，最主要的原因可能是，注射处理只将JHA注射到寄主植物韧皮部，吸食植物枝液降低了保幼激素类似物的利用率。JHA处理后，光照和温度以及降雨量，造成虫体表面的保幼激素类似物的挥发和流失，不同程度的降低实际作用的效果，直接的影响JHA对2地区白蜡虫2龄雄幼虫的作用，造成白蜡虫个体泌蜡量的差异。由此可以推断，外源保幼激素类似物对白蜡虫泌蜡量的作用效果也存在地域差异主要与所处生态的环境(光照、气温、寄主植物、土壤)有关，其次还与两地种虫来源存在密切的关系。

3.2 JHA对白蜡虫雄虫蛹发育的影响

保幼激素作为一种生长调节剂，控制着生命中很多位点，JHA结合內源保幼激素协同调节昆虫的发育，不同浓度JHA会显示不同的调节效果[10,21]。JHA降低小菜蛾羽化率但对幼虫的蛹质量没有显著影响[18]。基于外源保幼激素类似物喷施和涂干下对四川峨眉地区白蜡虫的作用效果优于昆明地区，数据分析选择四川峨眉地区。JHA处理后，从白蜡虫雄虫蛹的体长、个体质量以及羽化率的结果分析来看，在一定浓度范围内，白蜡虫雄虫蛹的体长与JHA之间存在一定的负相关性，且喷施的作用效果整体上优于涂干处理；JHA处理下，大多数试验结果表明，低浓度JHA可能促进白蜡虫蛹的个体质量发育，高浓度JHA抑制白蜡虫蛹的个体质量发育；然而，无论是喷施处理还是涂干处理，高浓度JHA处理下蛹的羽化率都表现出了最高值，最高达81.62%。在完全变态昆虫发育的蛹期，昆虫蛹期缺乏保幼激素才得以向成虫转变[10]，然而，在白蜡虫的研究中发现，JHA却不同程度的增加了蛹的羽化率，似乎与其他昆虫之间存在差异，可能本试验选取的JHA的浓度过低并没有达到阻断羽化的阀值。

综合分析喷施中等浓度的保幼激素类似物既增加白蜡虫2龄雄幼虫的泌蜡量又增加白蜡虫蛹的羽化率，为进一步扩大白蜡的生产和白蜡虫种群的繁衍奠定基础。

4 结论

(1)中浓度JHA喷施处理2龄雄幼虫可显著提高白蜡虫的泌蜡量，峨眉白蜡虫种群增产率最高可达25.56%，昆明白蜡虫种群增产最高达41.50%。

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(2)JHA处理能显著影响白蜡虫雄虫的生长，造成蛹体长明显下降；JHA浓度越高，影响越大；大多数试验结果表明，低浓度JHA可能促进白蜡虫蛹的体质量发育，高浓度JHA抑制白蜡虫蛹的体质量发育；喷施和涂干处理，高浓度可显著提高白蜡虫蛹的羽化率。

关于写话教学目标，《新课程标准》提出：1.对于写话有兴趣，留心周围事物，写自己想说的话，写想象中的事物。2.在写话中乐于运用阅读和生活学到的词语。3.根据表达的需要，学习使用逗号、句号、问号、感叹号。兴趣是最好的老师，对于刚开始规范运用汉字的低年级学生而言，从培养学生细心观察并善于表达的习惯，从而慢慢掌握运用字词句的规律。针对学生知识水平特点，充分利用表象思维引导学生写话，要引导学生根据阅读及生活中积累到的词语进行表达。

(3)本试验，中高浓度JHA促进白蜡虫蛹的羽化，说明白蜡虫蛹的羽化可能并不受其体质量和体长的影响。

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