植物基因组编辑技术流程

基因编辑（gene editing），又称基因组编辑（genome editing）或基因组工程（genome Engineering），是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术。2021年2月，《最高人民法院最高人民检察院关于执行，确定罪名的补充规定（七）》规定了非法植入基因编辑、克隆胚胎罪罪名。

1、获取目的基因（从基因组文库中获取或、利用PCR技术扩增目的基因）、2、基因表达载体的构建（这也是基因工程的核心）3、将目的基因导入受体细胞（植物、动物、微生物）4、目的基因的检测与鉴定 （DNA分子杂交技术,分子杂交技术、抗原抗体杂交）1、获取目的基因（从基因组文库中获取或、利用PCR技术扩增目的基因）、2、基因表达载体的构建（这也是基因工程的核心）3、将目的基因导入受体细胞（植物、动物、微生物）4、目的基因的检测与鉴定 （DNA分子杂交技术,分子杂交技术、抗原抗体杂交）

如何设计高效的植物sgRNA进行基因编辑1、目的基因的获取（1）目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因。（2）获取方法：①从基因文库中获取；②人工合成（反转录法和化学合成法）；③PCR技术扩增目的基因。2、基因表达载体的构建（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。如图：①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。